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電泳槽密封條漏液的原因與處理(垂直槽)
一般情況下,電泳槽較窄的密封條不易漏夜,反之較寬的則比較容易漏,發(fā)現(xiàn)電泳槽漏液時(shí)要檢查:
1、密封條是否老化或損壞,若已經(jīng)老化或損壞,水平核酸電泳槽供應(yīng)商,應(yīng)更換密封條。
2、如果密封條完好無損,目測(cè)檢查密封條是否有凹凸不平現(xiàn)象,水平核酸電泳槽報(bào)價(jià),如果有應(yīng)將密封條拆下進(jìn)行重新安裝。安裝時(shí)注意不要拉扯密封條,使其自然地嵌入密封槽內(nèi),并保證安裝均勻,避免密封條出現(xiàn)凹凸現(xiàn)象。
3、如果緩沖液是從密封條的中間漏出,則說明漏處比兩邊凹(不在同一水平線上),水平核酸電泳槽廠家,我們則需要把密封條拆下,清理干凈槽內(nèi)膠粘劑,然后再將薄厚相當(dāng)?shù)恼厳l(如0.4毫米)粘在槽內(nèi),以墊起凹下的密封條,使其與兩邊保持一致,此后再將密封條粘在槽內(nèi)即可。
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蛋白電泳常見問題及解決方法:
一,條帶出現(xiàn)“微笑”現(xiàn)象(中間凹下兩邊翹起)
主要是凝膠中間部分的凝固不均所致,水平核酸電泳槽,多出現(xiàn)較厚凝膠中,應(yīng)待凝膠充分凝固后再做后續(xù)操作。
二,條帶出“皺眉”現(xiàn)象(中間凸起兩邊下垂)
兩板之間底部氣泡所致,應(yīng)排除底部氣泡。
三,條帶出現(xiàn)“拖尾”現(xiàn)象
主要是樣品溶解效果不佳;分離膠濃度過大;電泳緩沖液時(shí)間過長(zhǎng)。
建議:加樣前離心;選擇合適的樣品緩沖液,加適量樣品促;重新配制電泳緩沖液;降低凝膠濃度。
四,條帶出現(xiàn)紋理現(xiàn)象
樣品中不溶性顆粒引起的。
加樣前離心,加適量樣品促。
五,指示帶已跑出板底,但樣品條帶還未跑下來
與緩沖液和分離膠濃度有關(guān)。
更換正確PH值的緩沖液,降低凝膠濃度。六,染色背景高,染色過程中試劑變?yōu)樗{(lán)色

影響核酸電泳分辨率的重要因素
研究結(jié)果表明:在低濃度、低電壓下,分離效果較好。在低電壓條件下,線性DNA分子的電泳遷移率與所用的電壓呈正比。但是,在電場(chǎng)強(qiáng)度增加時(shí),較大的DNA片段遷移率的增加相對(duì)較小。因此隨著電壓的上升,電泳分辨率反而下降,為了獲得電泳分離DNA片段的所需分辨率,電場(chǎng)強(qiáng)度不宜大于15V/cm。一般在5-10v之間。 電泳系統(tǒng)的溫度對(duì)于DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳行為沒有顯著的影響。通常在室溫下進(jìn)行電泳,只有當(dāng)凝膠濃度低于0.5%時(shí),為增加凝膠硬度,可在4℃,進(jìn)行電泳。
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