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水質(zhì)大腸菌群酶底物法檢測系統(tǒng)原理

一、檢測用途：酶底物法測定用途：用于檢測水中總大腸菌群糞大腸菌群（耐熱大腸菌群）和大腸埃希氏菌?？捎糜跈z測水的類型：飲用水、水源水、廢水、食品水、地表水、地下水、海水、瓶裝水、中水、二次供水、管網(wǎng)水、畜牧用水、yi療用水等。二、檢測原理：酶底物法采用ONPG 和MUG 兩種營養(yǎng)指示劑，這兩種試劑分別可以被大腸菌群的 β-半乳糖苷酶和大腸桿菌的 β-葡糖醛酸酶分解代謝。當(dāng)大腸菌群在酶底物檢測試劑中生長時，其使用 β-半乳糖苷酶分解代謝 ONPG，并使樣品從無色變?yōu)辄S色。大腸桿菌使用 β-葡糖醛酸酶分解代謝MUG 時，能夠發(fā)出熒光。

水質(zhì)pH值的檢測用電位法檢測水質(zhì)的pH值時，是以玻璃電極作指示電極，飽和甘gong電極作參比電極，侵入待測溶液中組成原電池，采用酸度計直接測量此原電池的電動勢，在酸度計上直接讀出待測水質(zhì)的pH值，在測量之前要先用pH標(biāo)準(zhǔn)緩沖液來校正儀器上的標(biāo)度，使指針?biāo)甘镜臉?biāo)度值恰好為標(biāo)準(zhǔn)溶液的pH值，程控定量封口機(jī)，然后在換上待檢測的水質(zhì)，就能測得其pH值了，不過為了盡量減少誤差，大家應(yīng)選用pH值與待檢測水質(zhì)相近的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液，而且在檢測的過程中盡量要保持溫度的恒定。

水中糞大腸菌群的常見檢測方法

1、聚合酶鏈?zhǔn)郊夹g(shù)

提取糞大腸菌群混懸液和待測水樣的DNA，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增編碼約260bp的LacZ基因（β-半乳糖苷酶基因）和約150BP的UdiA基因（β-D-半乳糖苷酶基因）的DNA，分別檢測大腸菌群數(shù)和大腸桿菌。

2、熒光原位雜交技術(shù)

由于糞大腸菌群特異的DNA序列，借助熒光標(biāo)記的特異寡聚核苷酸片段作為的探針與待測水樣中的DNA分子雜交，將雜交細(xì)胞經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進(jìn)行定性、定量分析，確定菌群數(shù)。