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使用血清細(xì)胞培養(yǎng)的操作技巧

1.保存在-5℃至-2O℃。若存放于4℃時(shí)，請(qǐng)勿超過一個(gè)月。若一次無法用完一瓶，建議無菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)娜萜鲀?nèi)，再放回冷凍。

2.將血清從冷凍箱取出后，先置于2～8℃冰箱使之融解，然后在室溫下使之全融。但必須注意的是，融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

3.一旦在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生su時(shí)，應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因?yàn)橐恍┛股鷖u和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

4.解凍血清時(shí)，請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生。

   細(xì)胞培養(yǎng)的污染源:

   物理性污染：物理性污染通過影響細(xì)胞培養(yǎng)體系中的生化成分，從而影響細(xì)胞的代謝，如溫 度、fang射線、振動(dòng)、輻射(紫外線或熒光)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。常見的例子有：培養(yǎng)箱溫度過高、周圍放置能引起機(jī)械振動(dòng)的設(shè)備、試劑放在有玻璃門的冰箱中長期受到光照等。物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染。

   細(xì)胞培養(yǎng)的污染源

   霉菌污染：種類很多，污染的多是曲霉菌，抗體批發(fā)，白色念zhu菌，酵母菌，黑霉菌，孢子菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成淡黃色或是白色的漂浮物，一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不變混濁。倒置顯微鏡下可以看見細(xì)胞之間有縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀，抗體費(fèi)用，樹枝狀或管狀菌絲，并漂浮在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡下可以看見鏈狀排列的菌株。念zhu菌及酵母菌菌株呈卵圓形，廈門抗體，散在細(xì)胞上及細(xì)胞周邊生長。處理：確認(rèn)是霉菌污染，如果細(xì)胞種類不是特別的珍貴，抗體多少錢，直接放棄，并將實(shí)驗(yàn)環(huán)節(jié)消毒。萬不得已，可以嘗試抗霉菌素如兩xing霉 su B來清楚污染，實(shí)際操作中效果很難保證。