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武漢思特進(多圖)-吉林洋蔥亞細胞定位方法

洋蔥亞細胞定位方法廠家

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武漢思特進科技發(fā)展有限公司成立于2007年，是一家以實驗技術(shù)研發(fā)、實驗產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實驗項目承接為一體的高新技術(shù)公司；公司實驗中心有分子生物學(xué)平臺、細胞平臺、光鏡平臺、植物組培平臺、原核蛋白表達平臺、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺；可以開展各類動、植物、、細胞等生物實驗。

洋蔥(Allium cepa L.)屬百合科蔥屬，是主栽蔬菜之一，也是我國主要的出口蔬菜之一。FT(FLOWERING LOCUS T)基因是開花植物光周期反應(yīng)過程中調(diào)控植物成花的關(guān)鍵基因，也是重要的開花整合因子。實驗室在前期工作中已經(jīng)成功了洋蔥的開花素類似基因Ac FT1及Ac LFT，為確定其功能，本試驗分別構(gòu)建了Ac FT1及Ac LFT的正義、反義和RNAi干擾的植物表達載體，通過凍融法導(dǎo)入到根癌農(nóng)EHA105中，進而通過花序侵染法轉(zhuǎn)入模式植物擬南芥中。通過熒光定量PCR法測定Ac FT1及Ac LFT在擬南芥抽薹前葉片中的相對表達含量，觀察轉(zhuǎn)化植株的形態(tài)學(xué)指標，繼而確定Ac FT1及Ac LFT在洋蔥成花中的作用，為實現(xiàn)洋蔥抽薹開花的基因調(diào)控提供參考。試驗結(jié)果歸納如下:⑴構(gòu)建了Ac FT1的正義植物表達載體p Z-Ac FT1，反義植物表達載體p R-AcFT1，RNAi植物表達載體p RNAi-Ac FT1;構(gòu)建了AcLFT的正義植物表達載體p Z-AcLFT，反義植物表達載體p R-Ac LFT，RNAi植物表達載體p RNAi-Ac LFT.;⑵利用凍融法將重組質(zhì)粒p Z-Ac FT1、p R-Ac FT1、p RNAi-Ac FT1、p Z-Ac LFT、p R-Ac LFT、p RNAi-Ac LFT導(dǎo)入根癌農(nóng)EHA105中，利用花序侵染法對擬南芥進行轉(zhuǎn)化。

為建立根癌農(nóng)介導(dǎo)的香蕉遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)，本研究以雄性花誘導(dǎo)產(chǎn)生的貢蕉胚性懸浮系為轉(zhuǎn)化受體，從潮篩選濃度和篩選方法兩方面進行了優(yōu)化。研究結(jié)果表明，貢蕉懸浮系在M2液體培養(yǎng)下潮的適合篩選濃度為5mg/L。將液體共培養(yǎng)7d后的貢蕉胚性懸浮系轉(zhuǎn)接到M2液體篩選培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，每10d繼代一次。GUS組織染色表明，經(jīng)過3代抗性篩選的ECS幾乎全為轉(zhuǎn)化細胞。經(jīng)過3個月的胚誘導(dǎo)培養(yǎng)獲得成熟抗性體細胞胚，平均抗性體細胞胚得率為4580個／mLPCV。同時，轉(zhuǎn)化苗的PCR檢測結(jié)果表明，gus基因已整合到貢蕉基因組中。本研究表明液體篩選系統(tǒng)有利于轉(zhuǎn)化胚性懸浮細胞的增殖，大大地提高了香蕉轉(zhuǎn)基因的轉(zhuǎn)化效率。

花色苷(anthocyanins)是一種重要的天然水溶性色素，洋蔥亞細胞定位方法，廣泛存在于植物的根、莖、葉、花、果實等的細胞液中，從而使其呈現(xiàn)出紅色、蘭色或紫色等顏色?；ㄉ帐怯苫ㄉ张浠?苷元)與糖通過糖苷鍵結(jié)合而成的一類多酚類化合物，具有重要的生物活性，對人體具有、、、降、防治疾病等多種生理保健功能，并且富含花色苷的蔬菜還可作為天然色素的良好來源，因此可應(yīng)用于食品、藥品和化妝品中。近年來，有關(guān)花色苷的研究一直是國內(nèi)外研究的熱點。由于其種類繁多、來源廣泛、安全無毒并有一定的營養(yǎng)和保健功效而引起國內(nèi)外的廣泛關(guān)注，具有十分重要的開發(fā)價值和廣闊的應(yīng)用前景。本課題以六種紫色蔬菜(紫洋蔥、紫甘藍、羽衣甘藍、紫山藥、紫薯、紫紅薯)為試材，系統(tǒng)研究了蔬菜中花色苷的前處理方法、定性定量及活性篩選方法，旨在為開發(fā)利用紫色蔬菜中豐富的花色苷資源提供方法和技術(shù)支撐。

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