制備液相色譜儀是近30年發(fā)展起來的一種具有高靈敏度、高選擇性的快速分離分析技術(shù)。它既能用于微量組分的分析測(cè)定,又能用于大量的制備分離,靈活多樣,其應(yīng)用范圍已超過其他各種分離方法,尤其在中藥樣品的分析分離方面更充分發(fā)揮它的特長(zhǎng),為推動(dòng)該領(lǐng)域的進(jìn)步和發(fā)展作出了巨大貢獻(xiàn)。 根據(jù)用途和泵配置的不同,一般可以將常見的實(shí)驗(yàn)室級(jí)別LC分為以下幾種:分析型液相色譜儀(HPLC),半制備液相色譜儀(Semi-PrepHPLC)和制備型液相色譜儀(Prep-HPLC)以及中壓液相色譜儀(MPLC)。這三者的原理基本一樣,不同之處主要在于泵的大流速,高壓制備液相色譜儀,一般而言,分析型HPLC的大流速為10.00mL/min,半制備HPLC為50mL/min,制備HPLC為100mL/min,中壓液相色譜更高。而由于泵流速的升高,流通池的光程、體積,管道的內(nèi)徑,六通閥、定量環(huán)等零件也會(huì)相應(yīng)改變;并且,根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的需要,可以增加自動(dòng)接收1器等配件。
LC-100液相色譜系統(tǒng)分析前準(zhǔn)備: 1、流動(dòng)相前處理:將流動(dòng)相經(jīng)過0.45um的微孔濾膜過濾后,倒入流動(dòng)相瓶中,放入超聲波清洗器內(nèi)震蕩排氣20分鐘左右?! ?、流動(dòng)相安裝:將處理好的流動(dòng)相放在儲(chǔ)液托盤上,將對(duì)應(yīng)通道的洗液管路分別放入流動(dòng)相瓶中,蓋好瓶蓋并記好對(duì)應(yīng)通道的流動(dòng)相種類?! ?、樣品記錄:將樣品處理稀釋后使用注射1器過濾頭過濾后裝入1.5ml樣品瓶中(大約三分之二),廣東制備液相色譜儀,放入自動(dòng)進(jìn)樣器的樣品架上,并記錄樣品瓶位置以便設(shè)置批處理文件?! ?、色譜柱安裝:打開柱溫箱門,將色譜柱的出口端安裝在色譜柱夾具上,在色譜柱上連接配管,在色譜柱出口端連接檢測(cè)器入口端的藍(lán)色PEEK管。 5、檢查清洗液:在RINSE通道內(nèi)放置50%甲1醇:水溶液;含有兩根管路的通道內(nèi)放置10%異丙1醇:水溶液。

色譜法的分離方法,有柱色譜法、紙色譜法、薄層色譜法、氣相色譜法、液相色譜法等。色譜所用應(yīng)與試樣不起化學(xué)反應(yīng),并應(yīng)用純度較高的。色譜時(shí)的溫度,除氣相色譜法或另有規(guī)定外,系指在室溫下操作。分離后各成分的檢出,應(yīng)采用各單體中規(guī)定的方法。通常用柱色譜、紙色譜或薄層色譜分離有色物質(zhì)時(shí),可根據(jù)其色帶進(jìn)行區(qū)分,快速制備液相色譜儀價(jià)格,對(duì)有些無色物質(zhì),可在245-365nm的紫外燈下檢視。紙色譜或薄層色譜也可噴顯色劑使之顯色。薄層色譜還可用加有熒光物質(zhì)的薄層硅膠,采用熒光熄滅法檢視。用紙色譜進(jìn)行定量測(cè)定時(shí),可將色譜斑點(diǎn)部分剪下或挖取,高壓純化制備液相色譜儀,用溶出該成分,再用分光光度法或比色法測(cè)定,也可用色譜掃描儀直接在紙或薄層板上測(cè)出,也可用色譜掃描儀直接以紙或薄層板上測(cè)出。柱色譜、氣相色譜和液相色譜可用接于色譜柱出口處的各種檢測(cè)器檢測(cè)。柱色譜還可分部收集流出液后用適宜方法測(cè)定。
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