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杭州市cm-瓊脂糖凝膠廠家

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CM-瓊脂糖凝膠 FF

 

一、產(chǎn)品簡介:

  CM-瓊脂糖凝膠FF是一種將羧鍵合在瓊脂糖微球上形成的帶有弱酸陽離子基團的層析分離介質(zhì)。該產(chǎn)品保留了天然多糖化合物極好的親水性及大網(wǎng)架結(jié)構(gòu),與生物活性大分子有很好的相容性,具有高離子交換容量,無非特異性吸附,快流速操作等特點,廣泛用于蛋白質(zhì)、核酸、多肽及多糖等的生物大分子實驗室規(guī)模制備和生物制藥、生物工程的大工業(yè)化制備。

  二、理化性能指標:

指標名稱

指標

外觀

乳白色半透明球狀顆粒

配基

-O-CH2COO-

離子交換類型

弱酸陽離子基團,可交換離子H+

基質(zhì)

6%交聯(lián)瓊脂糖

蛋白質(zhì)吸附容量,mg溶菌酶/mL

約105

總離子交換容量,mmol/mL

0.10-0.18

粒徑范圍,μm

45-165

運行流速(0.01Mpa/cm柱高)cm/h

20-40

工作溫度°C

4-40

耐熱(pH7水中,30min)°C

120

耐壓MPa/cm柱高

0.05

pH穩(wěn)定性

2-14(短時間,在位清洗);4-13(長時間)

pH工作范圍

5-11

化學穩(wěn)定范圍

常用的水相緩沖液;1mol/L氫;8mol/L尿素;
6mol/L胍;70%

  三、pH滴定曲線:

  CM-瓊脂糖FF分離介質(zhì)pH滴定曲線

  四、產(chǎn)品使用方法:

  1. 裝柱

  1.1 根據(jù)分離目標性質(zhì)配制初始緩沖液(平衡液)和洗脫緩沖液。

  1.2 將所取凝膠抽干,用初始緩沖液(按凝膠∶緩沖液=3∶1的比例)配成勻漿并脫氣。

  1.3 將層析柱垂直固定,底端用水或緩沖液潤濕并保持一段液位。

  1.4 用玻璃棒引導勻漿沿著柱內(nèi)壁一次性倒入柱內(nèi),使凝膠在柱內(nèi)自由沉降,水封層析柱,沉降過夜。

  1.5 連結(jié)好柱子活動柱頭,打開蠕動泵,讓緩沖液用使用時操作流速流過5柱體積,再使用1.5倍的操作流速流過5柱體積,調(diào)節(jié)適配柱頭,使其盡量貼近膠面,最后用2-3倍柱體積的緩沖液平衡柱子。

  注意:所有操作過程不能引入氣泡,保證裝膠的均勻度。

  2. 平衡

  將平衡緩沖液以操作流速平衡層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導、pH等參數(shù)不變。平衡緩沖液根據(jù)目標物性質(zhì)和pH要求可選擇Tris-、PBS、檸檬酸-檸檬酸鈉、、醋酸-醋酸鈉等緩沖液。

  3. 上樣

  切換轉(zhuǎn)換閥進行上樣,上樣量根據(jù)樣品的性質(zhì)和層析介質(zhì)的量進行選擇,也可進行線性實驗找到上樣量;樣品的預處理:除鹽,平衡液配制,0.45mm微孔濾膜過濾。

  4. 沖洗

  用2-3個柱體積的平衡緩沖液沖洗上樣后的層析柱,觀察檢測器的變化,直到電導、pH等參數(shù)不變,此時未交換的組分被清洗出去。

  5. 洗脫

  CM-瓊脂糖凝膠FF的洗脫可用恒定洗脫、梯度洗脫或者階躍洗脫,一般推薦增大鹽濃度的梯度洗脫進行。

  6. 再生

  用高鹽濃度的緩沖液(含1-2mol/LNaCl)按操作流速沖洗3-5個柱體積,接著用平衡液洗到平衡3-5個柱體積。

  若有失活蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì)在再生時洗不掉,可用在位清洗(CIP)除去。

  7. 在位清洗(CIP)

  對于強結(jié)合蛋白質(zhì)或脂類物質(zhì),可采用以下流程進行在位清洗:1mol/LNaOH洗2個柱體積,4mol/L尿素或3mol/L胍洗2個柱體積,70%或30%洗2個柱體積,平衡緩沖液洗2個柱體積。

  在位清洗可有效去除介質(zhì)上的雜質(zhì),同時介質(zhì)上的熱源也可基本去除。

  五、包裝、貯存、運輸、保質(zhì)期:

  1. 包裝:聚胺酯瓶密封包裝,規(guī)格為250毫升、1升、5升和10升。

  2. 貯存:20%,4°C冰箱保存。

  3. 運輸:4°C、常壓、避光。

  4. 保質(zhì)期:5-10年。

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