山東康德萊凈化*-核酸檢測實驗室PCR方案

為避免提取的核酸在柜內(nèi)反復(fù)循環(huán)，造成標(biāo)本之間的交叉污染，出現(xiàn)假陽性結(jié)果，該區(qū)域配備的生物安全柜必須是B2型的。生物安全柜工作區(qū)垂直氣流全部來自實驗室，排風(fēng)經(jīng)過過濾器(www.rfilter.com)過濾后直接排至室外，不允許回到安全柜和實驗室中。

根據(jù)經(jīng)驗，如果實驗室內(nèi)配備生物安全柜，每配備一臺，核酸檢測實驗室PCR設(shè)計，實驗室的面積增加10m2;標(biāo)本制備區(qū)的面積宜在25m2~30m2之間。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為正壓，以避免從鄰近區(qū)進入本區(qū)的氣溶膠污染。

擴增室該區(qū)域主要進行的操作為DNA或cDNA擴增。此外，已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來自試劑貯存和制備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進行。

在巢式PCR測定中，通常在輪擴增后必須打開反應(yīng)管，核酸檢測實驗室PCR方案，因此巢式擴增有較高的污染危險性，第二次加樣必須在本區(qū)內(nèi)進行。

擴增室主要配備PCR實驗室的核心儀器PCR儀，本文實例中使用了ABI7500和ABI9700兩種PCR儀。

在實驗室建造過程中，需要給PCR儀配備專門的UPS電源，以保證其正常工作。該區(qū)面積控制在15m2~20m2。

本區(qū)的壓力梯度要求為:相對于鄰近區(qū)域為負(fù)壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。為避免氣溶膠所致的污染，應(yīng)盡量減少在本區(qū)內(nèi)的不必要的走動。個別操作如加樣等應(yīng)在超凈臺內(nèi)進行。建議采用5~10Pa壓差，在控制上比較容易實現(xiàn)。

1.核酸檢測實驗室介紹核酸檢測實驗室是分子生物學(xué)研究和實驗的常規(guī)方法，也是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)臨床等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的實驗技術(shù)。 實驗室通常分為四個區(qū)域，核酸檢測實驗室PCR施工，即：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣品制備區(qū)、核酸配制和擴增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)(如使用全自動分析儀，市北區(qū)核酸檢測實驗室PCR，區(qū)域可適當(dāng)合并)。 進入各個區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進行(單向走廊)，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服(例如不同的顏色)。工作人員離開時，不得將工作服帶出。

①活性炭吸附:活性炭吸附的優(yōu)點是吸附效率更高，應(yīng)用范圍更廣，并且PCR實驗室凈化能夠同時處理多種混合廢氣。該系統(tǒng)是利用活性炭本身的吸附力，結(jié)合風(fēng)機作用將有機廢氣分子吸附住，對苯、醇、酮、酯、類等大分子的廢氣有很好的吸附作用，但對化學(xué)實驗室產(chǎn)生的小分子廢氣不能完全有效處理。在使用過程中PCR實驗室凈化效率隨使用時間的增加而降低，需要定期更換與再生，阻力大(約為600～900 Pa)，能耗高，占地面積大(處理1 000 m3/h廢氣的活性炭箱需占地5.2 m2)，由于各PCR實驗室凈化通風(fēng)柜較多，屋頂通風(fēng)設(shè)備相對較多，無法滿足大量設(shè)置活性炭箱的占地需求。