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液相色譜柱注意事項(xiàng)
色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操作過程中,需要注意下列問題,以維護(hù)色譜柱。?
① 避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料,因此在調(diào)節(jié)流速時(shí)應(yīng)該緩慢進(jìn)行,在閥進(jìn)樣時(shí)閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
② 應(yīng)逐漸改變的組成,gel 凝膠色譜柱報(bào)價(jià),特別是反相色譜中,不應(yīng)直接從改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/p>
③ 一般說來色譜柱不能反沖,只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時(shí),gel 凝膠色譜柱,才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
④ 選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時(shí)可以在進(jìn)樣器前面連接一預(yù)柱,分析柱是鍵合硅膠時(shí),預(yù)柱為硅膠,可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。
⑤ 避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi),需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
⑥ 經(jīng)常用強(qiáng)沖洗色譜柱,保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時(shí),對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的逐漸過渡,每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50~75ml。
固相萃取柱和液相色譜柱的比較
兩者本質(zhì)上是不同的東西,固相萃取柱是用來做固相萃取用的,主要作用是過濾和富集樣品,gel 凝膠色譜柱哪家好,而液相色譜柱是液相色譜上使用的,用來分析樣品的。
固相萃取柱是樣品處理的時(shí)候用的,液相色譜柱是儀器上的一個(gè)配件相當(dāng)于,機(jī)子不可或缺的一部分,使組分分開才進(jìn)檢測器檢測的。
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液相色譜柱流動性
1、在進(jìn)行樣品檢測前,gel 凝膠色譜柱價(jià)格,至少使用20倍柱體積流動相使色譜柱充分平衡。流動相一定要使用色譜級別的。如使用水相的緩沖液應(yīng)當(dāng)天配制以保持新鮮避免產(chǎn)生。
2、流動相使用前需用微孔濾膜過濾,流動相中顆粒對色譜系統(tǒng)和色譜柱的損壞。緩沖液與其他流動相混合后應(yīng)重新過濾避免溶解度變化造成產(chǎn)生新的沉淀。不應(yīng)使用純水作為流動相沖洗C18色譜柱,以免柱性能損壞(添加5%的沖洗色譜柱,同時(shí)可以達(dá)到對緩沖鹽清洗的作用。還可以使色譜柱更容易平衡)。
3、流動相需脫氣后使用,可避免因氣泡導(dǎo)致的泵和檢測器的工作不正常。如果測試時(shí)使用的流動相與色譜柱保存使用的流動相有較大區(qū)別,應(yīng)該使用過度分布的形式進(jìn)行平衡。避免由于流動相的突然變化造成柱壓增加過大或流動相緩沖鹽結(jié)晶造成對色譜柱和儀器系統(tǒng)的損壞。正相色譜柱比反相色譜柱需要更長的平衡時(shí)間。

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