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試驗中如何避免抑菌圈測定儀產(chǎn)生不正常形狀
1.鋼管兩端面不夠平,使漏出,破壞了均勻擴散現(xiàn)象。雙碟底面不平或制備瓊脂培養(yǎng)基平板時工作臺不水平,可造成基層厚度不均勻,因此應選擇加工相同的鋼管,兩端面不同的切勿混用;挑選底平的雙碟,調(diào)整工作臺的水平。
2.玻璃雙碟、鋼管、鋼管放置器等被液污染,會使抑菌圈,有時甚至使試驗菌被抑制,因此,在整個試驗中要嚴格防止污染。
3.在制備瓊脂培養(yǎng)基菌層時,培養(yǎng)基溫度過高或受熱時間過長,可造成試驗菌部分被或全部被,使抑菌圈甚至無菌。控制方法是根據(jù)要求不同,江西藥敏報價,將培養(yǎng)基均勻降溫,管碟法藥敏報價,溫度平衡后,再加入試驗菌。
4.在滴加溶液至鋼管內(nèi)時,毛細滴管口易濺出溶液滴在瓊脂培養(yǎng)基表面,不易覺察,影響抑菌圈,多碟藥敏報價,因此滴加溶液時毛細滴管內(nèi)不得有氣泡,避免管口太細,毛細滴管距離鋼管口不應太高。
5.瓊脂培養(yǎng)基上鋼管間隔距離太小而抑菌圈較大時,會形成互相影響的卵圓形或橢圓形的抑菌圈。調(diào)整抑菌圈的直徑可解決此問題。如:增加菌層培養(yǎng)基內(nèi)的試驗菌量;降低溶液的濃度;調(diào)整稀釋用的緩沖液的PH值或鹽濃度;調(diào)整培養(yǎng)基的配方。
6.雙碟培養(yǎng)過程中,菌落計數(shù)藥敏報價,溫度不均勻,雙碟上生長速度不一致,造成抑菌圈小或不圓,影響在瓊脂培養(yǎng)基內(nèi)的擴散系數(shù)。因此在培養(yǎng)過程中應使用水浴恒溫培養(yǎng)箱,保證受熱均勻。
抑菌圈測定儀濾紙片法:
將一定大小蘸有藥液的小濾紙片,放在含菌培養(yǎng)基平面上,因藥劑的擴散作用形成不同的抑菌圈,以此比較藥劑的毒力。此法是殺菌劑生物測定中應用廣泛的方法之一,主要用于物質(zhì)的篩選、藥劑在植物體內(nèi)殘留測定及藥劑變質(zhì)和組分差異的測定。是把定量濾紙用打孔器打成直徑6~8毫米的小片,經(jīng)后浸蘸含有物質(zhì)的不同濃度的稀釋液或用滴管將一定量的微量藥液滴在小濾紙片上,晾干后置于含菌培養(yǎng)基平面上。適溫培養(yǎng)一定時間后,由于藥劑的滲透和擴散作用即形成抑菌圈。根據(jù)抑菌圈直徑(或直徑平方)與藥劑濃度對數(shù)成函數(shù)關系,繪出藥量一反應毒力回歸線。在一定濃度范圍內(nèi),以抑菌圈直徑為縱軸,以藥劑濃度對數(shù)值為橫軸畫出直線。測定時根據(jù)標準藥劑的標準曲線來比較所測藥劑的毒力或進行定性定量分析。
抑菌圈測定儀方法
管碟法:在含菌培養(yǎng)基平面上放置一定大小的不銹鋼圈,在其中滴加藥液,通過藥劑水平擴散形成大小不同的抑菌圈來比較藥劑毒力。目前上將此法定為的標準方法。此外還用于素類藥劑的篩選、定性定量分析和在動植物體內(nèi)殘留量的測定方面。
滴下法:利用、毛細管等器具,將藥液直接滴加在含菌培養(yǎng)基平面上,培養(yǎng)一定時間后,根據(jù)抑菌圈大小不同來比較藥劑毒力的方法。