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凝膠的種類及性質(zhì)
(一)交聯(lián)葡聚糖凝膠(Sephadex)
(1)Sephadex G交聯(lián)葡聚糖的商品名為Sephndex,不同規(guī)格型號(hào)的葡聚糖用英文字母G表示,G后面的拉伯?dāng)?shù)為凝膠得水值的10倍。例如,G-25為每克凝膠膨脹時(shí)吸水2.5克,同樣G-200克每克千膠吸水20克。交聯(lián)葡聚糖凝膠的種類有G-10,G-15,G-25,G-50,G-75,G-100,G-150,院線緊致凝膠加盟,和G-200。因此,“G”反映,凝膠的交聯(lián)程度,膨脹程度及分部范圍。(2)Sephadex LH-20,是—Sephadex G-25的羧丙基衍生物,能溶于水及親脂,用于分離不溶于水的物質(zhì)。
(二)瓊脂糖凝膠:
商品名很多,常見的有,Sepharose(瑞典,pharmacia ) ,Bio-Gel-A(美國(guó)Bio-Rad)等。瓊脂糖凝膠是依靠糖鏈之間的次級(jí)鏈如氫鍵來維持網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的疏密依靠瓊脂糖的濃度。一般情況下,它的結(jié)構(gòu)是穩(wěn)定的,可以在許多條件下使用(如水,pH4-9范圍內(nèi)的鹽溶液)。瓊脂糖凝膠在40℃以上開始融化,也不能高壓消毒,可用化學(xué)活處理。
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凝膠的樣品溶液的處理
樣品溶液如有沉淀應(yīng)過濾或離心除去,許昌緊致凝膠加盟,如含脂類可高速離心或通過Sephadex G-15短柱除去。樣品的粘度不可大,含蛋白為超過4%,粘度高影響分離效果。上柱樣品液的體積根據(jù)凝膠床體積的分離要求確定。分離蛋白質(zhì)樣品的體積為凝膠床的1-4%(一般約0.5-2ml),婦用緊致凝膠加盟,進(jìn)行分族分離時(shí)樣品液可為凝膠床的10%,在蛋白質(zhì)溶液除鹽時(shí),樣品可達(dá)凝膠床的20-30%。分級(jí)分離樣品體積要小,使樣品層盡可能窄,洗脫出的峰形較好。(五〉防止微生物的污染交聯(lián)葡聚糖和瓊脂糖都是多糖類物質(zhì),防止微生物的生長(zhǎng),在凝膠層析中十分重要,常用的抑菌劑有:
1)疊氨鈉(NaN3)在凝膠層析中只要用0.02%疊氮鈉已足夠防止微生物的生長(zhǎng),疊氮鈉易溶一水,在20℃時(shí)約為40%;它不與蛋白質(zhì)或碳水化合物相互作用,因此疊氮鈉不影響活力;不會(huì)改變蛋白質(zhì)和碳水化合物的層析我特性。疊氮鈉可干擾熒光標(biāo)記蛋白質(zhì)。2可樂酮[Cl3C-C(OH)(CH3)2]在凝膠層析中使用濃度為0.01-0.02%。在微酸性溶液中它的效果佳,在強(qiáng)堿性溶液中或溫度高于60℃時(shí)易引起分解而失效。
3)代疏基水楊酸鈉在凝膠層析中作為抑菌劑使用濃度為0.05-0.01%。在微酸性溶液中為有效。重金屬離子可使代疏基的物質(zhì)結(jié)合,因而包含疏基的蛋白質(zhì)可在不同程度上降低它的抑菌效果。
(4)代鹽在凝膠層析中使用濃度為0.001-0.01%。在微堿性溶液中抑效果佳,長(zhǎng)時(shí)間放置時(shí)可與鹵素、根離子作用而產(chǎn)生沉淀;還原劑可引起此化合物分解:含疏基的物質(zhì)亦可降低或抑制它的抑菌作用。
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1.什么是凝膠?有何特征(兩個(gè)不同)?
外界條件(如溫度、外力、電解質(zhì)或化學(xué)反應(yīng))的變化使體系由溶液或溶膠轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N特殊的半固體狀態(tài),即凝膠。
(又稱凍膠)其一,凝膠與溶膠(或溶液)有很大的不同。溶膠或溶液中的膠體質(zhì)點(diǎn)或大分子是獨(dú)立的運(yùn)動(dòng)單位,可以自由行動(dòng),因而溶膠具有良好的流動(dòng)性。凝膠則不然,分散相質(zhì)點(diǎn)互相連接,在整個(gè)體系內(nèi)形成結(jié)構(gòu),液體包在其中,隨著凝膠的形成,體系不僅失去流動(dòng)性,而且顯示出固體的力學(xué)性質(zhì),如具有一定的彈性、強(qiáng)度、屈服值等。
其二,凝膠和真正的固體又不完全一樣,它由固液兩相組成,屬于膠體分散體系,共結(jié)構(gòu)強(qiáng)度往往有限,易于遭受變化。改變條件,美容院緊致凝膠加盟,如改變溫度、介質(zhì)成分或外加作用力等,往往能使結(jié)構(gòu)破壞,發(fā)生不可逆變形,結(jié)果產(chǎn)生流動(dòng)。
由此可見,凝膠是分散體系的一種特殊形式,共性質(zhì)介于固體和液體之間。
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