Dispase II

Dispase 即為中性蛋白酶，也稱分散酶，是一種非特異性的金屬蛋白酶，用于從不同組 織或器官中消化細胞外基質(zhì)，釋放并制備原代單細胞；或用于細胞培養(yǎng)中的細胞收獲或接種 轉(zhuǎn)移；也被用于防止懸浮細胞培養(yǎng)時的細胞意外結(jié)團。 常用的胰蛋白酶、膠原酶和鏈酶蛋白酶都屬于蛋白水解酶類，用于分散組織、分離細胞， 但其對細胞傷害大，細胞在培養(yǎng)時不穩(wěn)定，甚至引入支原體污染。Dispase 不會傷害細胞膜， 且因為其來源于，故不會引入支原體或任何動物病DU；溫度、pH、血清成分等的差異 對 Dispase 影響很小。Dispase 經(jīng)稀釋后其活性就大大降低，這也方便了后續(xù)的培養(yǎng)。 Dispase 優(yōu)點： 該酶作用迅速有效又溫和； 細胞能保持完整，無損細胞膜； 該酶為來源，不含支原體或動物病DU污染； 對于溫度、pH 的改變、以及血清成分都很穩(wěn)定； 使用螯合劑或稀釋即可簡單滅活。 酶活定義： 1U 是在檢測條件下 1 分鐘釋放相當于 1 umol 酪氨酸的 Folin 陽性氨基酸或肽的酶量； DispaseII：≥0.8 U/mg (37 度，使用酪蛋白作為底物，pH 7.5)； 抑制劑： EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金屬。血清不會抑制酶活性。 使用方法： 用 Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解 Dispase 至 10 mg/ml，使用時用細胞培養(yǎng)液稀釋到 0.6-2.4 U/ml。不推薦高于 2.4 U/ml 的工作濃度，可 用 0.22 um 的無菌濾膜過濾。 保存方法： 配成溶液后，4 度保存，2 周內(nèi)使用有效，-20 度保存，2 個月內(nèi)使用有效，不要反復(fù)凍 融；儲存液用 Hepes 鹽緩沖液稀釋后，4 度保存，3 天內(nèi)使用有效。 標簽： 中性蛋白   中性蛋白酶   北京市Dispase II   北京市Dispase II廠家