CELL-WISE 293無血清培養(yǎng)基特點,無血清培養(yǎng)基價格

CELL-WISE的293培養(yǎng)基是徠創(chuàng)生物自主研發(fā)，的質(zhì)量，平民的價格。全國誠招代理商，歡迎廣大新老客戶前來咨詢。

基本信息：

產(chǎn)品描述：

適用于懸浮培養(yǎng)條件下的HEK293細胞（如293-F,293-T, Expi-293F等）的高密度生長和瞬時轉(zhuǎn)染表達。 含有細胞生長所需的全部營養(yǎng)成份，無需添加任何添加物即可使用。（注意：不包含以及血清）

產(chǎn)品特點:

瞬時轉(zhuǎn)染，適用于HEK293細胞高密度懸浮培養(yǎng)

無蛋白、無動物源、化學成分限定

即用型完全,無需添加額外成分

技術參數(shù)：

使用方法：

細胞馴化

1）直接馴化

大部分情況下，培養(yǎng)于其他培養(yǎng)基中的細胞，可以直接適應Balance CD 293 medium，只要按照日常傳代方式（稀釋）更換即可。

2）漸進式馴化

注意：選用低代次、處于對數(shù)生長期的細胞進行馴化

①在原培養(yǎng)基中復蘇細胞并繼續(xù)使用傳代2到3次至細胞生長穩(wěn)定，當細胞密度達到2x10 6 cells/ml后進行傳代，傳代細胞密度控制在0.5-0.6×10 ⁶ cells/mL，5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為75:25；

②將細胞置于37℃，5% CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)；

③當細胞密度3-4天后達到3x10 ⁶ cells/ml且細胞活率>90%，傳代時5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293培養(yǎng)基的比例為50:50，細胞密度控制在0.5×10 ⁶ cells/mL。如細胞生長慢，可離心上清，留20%條件培養(yǎng)基，加入80%的5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基比例為75:25的混合培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)；

④重復步驟③逐步增加所占的比例(5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基與Balance CD 293 培養(yǎng)基的比例為25:75至10:90）直到的Balance CD 293培養(yǎng)基；

⑤經(jīng)過在的 Balance CD 293 培養(yǎng)基中的幾次傳代培養(yǎng)，傳代后3-4天細胞的密度可以達到2-3×10 ⁶  cells/mL，細胞活率大于90%，這說明細胞已經(jīng)完全適應了Balance CD 293 培養(yǎng)基。之后進行細胞的傳代培養(yǎng)時，細胞的起始密度可以降到0.3×10 ⁶ cells/mL，一般傳代2-3次后再進行轉(zhuǎn)染實驗。

注意: 一般細胞馴化過程中，代細胞的狀態(tài)可能不是很好，但一般從第四代狀態(tài)會有改善。

細胞傳代

1）取細胞培養(yǎng)樣品，人工或儀器測定細胞密度以及活率；

2）計算傳代所需的細胞用量，建議起始細胞密度為0.2-0.4×10 ⁶ cells/mL。建議復蘇的細胞至少培養(yǎng)兩代后再用于其他用途。傳代培養(yǎng)體積建議為15-20 mL（100 mL的培養(yǎng)瓶）或50-60 mL（250 mL 的培養(yǎng)瓶）；

3）將細胞置于37℃，5%CO2，轉(zhuǎn)速為110-175 rpm的恒溫搖床中進行培養(yǎng)，3-4天傳代一次。

細胞轉(zhuǎn)染在Balance CD 293培養(yǎng)基中，采用商業(yè)化轉(zhuǎn)染試劑或 PEI 可以實現(xiàn)對 HEK293 細胞的轉(zhuǎn)染。