介紹 固相萃取(Solid Phase Extraction , 簡(jiǎn)稱SPE)是從八十年代中期發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)樣品前處理技術(shù)。由液固萃取和液相色譜技術(shù)相結(jié)合發(fā)展而來(lái),主要用于樣品的分離、凈化和濃縮。 SPE小柱也稱固相萃取小柱,是一種用于萃取、分離、濃縮的樣品前處理裝置。應(yīng)用于各種食品、農(nóng)畜產(chǎn)品、環(huán)境樣品及生物樣品中,對(duì)目標(biāo)化合物的樣品前處理。
固相萃取優(yōu)勢(shì) 相對(duì)液液分配,SPE具有明顯的優(yōu)勢(shì),具體如下:
1. 高樣品回收率;
2. 能進(jìn)行樣品濃縮;
3. 高凈化效率;
4. 能同時(shí)提取極性范圍交廣的分析物;
5. 操作簡(jiǎn)單、省時(shí)、省力、易于自動(dòng)化;
6. 與分析儀器具有兼容性。
固相萃取原理 固相萃取是一個(gè)包括固相和液相的物理萃取過(guò)程。 在固相萃取過(guò)程中,固相對(duì)分析物的吸附力大于樣品基液。 當(dāng)樣品通過(guò)SPE柱時(shí),分析物被吸附在固體填料表面,而其他樣品組分基液通過(guò)柱子。 最后用適當(dāng)?shù)娜芤簩悠废疵撓聛?lái),從而對(duì)樣品進(jìn)行分離,純化或是濃縮作用。
固相萃取柱結(jié)構(gòu) 常用的SPE柱為管柱形式,柱體通常為醫(yī)用級(jí)PP管,在兩片聚乙烯篩板之間裝填0.1-2.0g填料粉末。此外,另有盤(pán)和固相微萃取的形式。一般來(lái)說(shuō),SPE小柱由三部分組成:柱管、篩板和填料。
固相萃取步驟 填料保留目標(biāo)化合物
1. 預(yù)處理(活化):預(yù)處理有兩個(gè)目的,一是去除填料中可能存在的雜質(zhì),二是對(duì)填料化,展開(kāi)碳?xì)滏I增加和分析物作用的表面積。填料化,提高結(jié)果的重現(xiàn)性對(duì)于反相填料來(lái)說(shuō), 預(yù)平衡是必須的,即先用強(qiáng)濕潤(rùn)固定相,然后用弱加以平衡。
2. 上樣:把處理好的樣品上柱,用正壓或負(fù)壓使樣品通過(guò)柱子。 樣品的流速必須控制,對(duì)于生物樣品,一般在1.5ml/min。對(duì)于以離子交換為作用機(jī)理的萃取,樣品通過(guò)SPE柱的速度應(yīng)該適當(dāng)降低,以保證分析物有足夠時(shí)間與SPE柱填料的離子交換基團(tuán)發(fā)生作用。
3. 淋洗:選擇合適,去除干擾雜質(zhì),使目標(biāo)分析物得以保留。
4. 洗脫:選擇合適強(qiáng)度的洗脫目標(biāo)分析物。
填料保留目標(biāo)化合物
1. 預(yù)處理(活化):預(yù)處理有兩個(gè)目的,一是去除填料中可能存在的雜質(zhì),二是對(duì)填料化,展開(kāi)碳?xì)滏I增加和分析物作用的表面積。填料化,提高結(jié)果的重現(xiàn)性對(duì)于反相填料來(lái)說(shuō), 預(yù)平衡是必須的,即先用強(qiáng)濕潤(rùn)固定相,然后用弱加以平衡。
2. 上樣:把處理好的樣品上柱,用正壓或負(fù)壓使樣品通過(guò)柱子。 樣品的流速必須控制,對(duì)于生物樣品,一般在1.5ml/min。對(duì)于以離子交換為作用機(jī)理的萃取,樣品通過(guò)SPE柱的速度應(yīng)該適當(dāng)降低,以保證分析物有足夠時(shí)間與SPE柱填料的離子交換基團(tuán)發(fā)生作用。
3. 洗脫:選擇合適強(qiáng)度的洗脫雜質(zhì)。
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