大豆球蛋白定量測定試劑盒龍科方舟出品96T酶聯(lián)*方法

大豆球蛋白檢測試劑盒實驗原理

本試劑盒采用間接競爭 ELISA 方法，在酶標板微孔條上預包被大豆球蛋 白抗原，樣本中的大豆球蛋白和預包被的抗原競爭大豆球蛋白抗體，加入酶 標二抗后，用 TMB 底物顯色，樣本吸光度值與其所含大豆球蛋白的含量呈 負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中大豆球蛋白的含量。

樣本類型

大豆及其深加工產(chǎn)品（如：豆粕、發(fā)酵豆粕、膨化大豆、大豆分離蛋白、 大豆?jié)饪s蛋白等）

技術參數(shù)

檢測范圍：2.8mg/g~179.2mg/g 反應溫度：37℃ 反應時間：75min 校準品 1～5 設定濃度分別為： 0mg/mL、2.8mg/mL、11.2mg/mL、44.8mg/mL、179.2mg/mL。 樣本在前處理過程中稀釋了 7000 倍，校準品實際濃度為設定濃度的 1/7000

試劑盒組成

30×濃縮樣本提取液：50mL

3×濃縮樣本稀釋液：50mL

20×濃縮洗液：50mL

大豆球蛋白檢測板：96T

大豆球蛋白校準品（1～5）：各 1mL

大豆球蛋白抗體工作液：7mL

大豆球蛋白酶標試劑：12mL

顯色液 A、B：各 7mL

終止液：7mL

蓋板膜 2 張、質檢報告 1 份、說明書 1 份

所需材料（不提供）

酶標儀（450、630nm 濾光片）、天平（感量 0.01g）、粉碎機、搖床、離 心機、洗板機/洗瓶、單、多道移液器及槍頭(單道 10～100mL、20～200mL、 多道 30～300mL)、量筒、50mL 離心管、2mL 離心管、加樣槽、吸水紙、計 時器、蒸餾水

簡易操作步驟

1. 提取：稱取樣本 0.30g 加 30mL1×樣本提取工作液，25℃提取 16h

2. 稀釋：4000rpm 離心 5min，用 1×樣本稀釋工作液稀釋 70 倍，混勻待檢

3. 加樣：加入校準品/待測樣本 50mL，抗體工作液 50mL，37℃孵育 30min

4. 洗板：用 1×洗滌工作液洗板 4 次，拍干

5. 加酶：加入酶標試劑 100mL/孔，37℃孵育 30min

6. 洗板：用 1×洗滌工作液洗板 4 次，拍干

7. 顯色：加入顯色液 A、B 的等體積混合液 100mL/孔，37℃孵育 15min

8. 終止：加終止液 50mL/孔，酶標儀讀數(shù)

9. 計算：數(shù)據(jù)帶入計算軟件