DIGE技術服務

輝駿生物已成功為各地科研單位服務超過3000張雙向凝膠電泳，數(shù)據(jù)已發(fā)表在專業(yè)雜志Proteomics.   上。


一、DIGE概述
        DIGE — 雙向熒光差異凝膠電泳(Two-dimensional fluorescence difference gel electrophoresis,2D-DIGE)，是在傳統(tǒng)雙向電泳的基礎上發(fā)展而來的新型蛋白質(zhì)組學定量技術，其分離蛋白質(zhì)混合的原理與雙向電泳是一致的，主要利用蛋白質(zhì)的等電點和分子量的差異來分離蛋白質(zhì)混合物，同時應用熒光染料的靈敏度及內(nèi)標的使用等技術，使其在定量蛋白質(zhì)組學的研究中效果明顯優(yōu)于傳統(tǒng)雙向電泳。
       DIGE使用的熒光染料有Cy2, Cy3和Cy5，它們能與蛋白質(zhì)的賴氨酸側(cè)鏈氨  基反應而使蛋白質(zhì)被標記，被標記蛋白質(zhì)的等電點和分子量幾乎不受影響，等量混合標記好的蛋白質(zhì)后進行雙向電泳，不同凝膠之間可以通過cy2內(nèi)標匹配，凝膠之間的差異，蛋白質(zhì)表達量的變化則通過cy3和cy5不同熒光的強度來體現(xiàn)。
 
二、與常規(guī)雙向電泳后，銀染或考染膠相比，DIGE具有以下優(yōu)勢：
     1、靈敏度高，最 低可檢測到125pg的蛋白質(zhì)；
     2、性，同一塊凝膠上可以電泳兩個樣品，減輕了工作量；
     3、線性范圍更廣,動態(tài)范圍高達10^-5；
     4、定量精 確, 采用內(nèi)標了凝膠與凝膠之間的實驗誤差，顯著提高了實驗的精 確度和可重復性；
     5、統(tǒng)計學分析，ImageMaster7.0（DIGE）軟件可以得到統(tǒng)計學可信的結(jié)果，降低了操作者之間的偏差。
 
三、DIGE技術服務流程

 
四、DIGE技術服務內(nèi)容
    1、 樣本制備與定量；
    2、熒光標記；
    3、雙向電泳和圖片分析；
    4、DIGE實驗報告提交。
 
五、送樣須知：
   1、技術咨詢：在您開展實驗之前，本公司將為您竭誠提供的DIGE實驗設計方案。
   2、為了保證DIGE實驗能順利進行，樣品須液氮或干冰保存寄送，廣州本地客戶可上門收樣。
注：樣本應避免各類污染和反復凍融。
 
六、實驗報告內(nèi)容
   1、DIGE熒光電子圖片；
   2、蛋白質(zhì)點定量分析結(jié)果，包括差異點號碼、差異倍數(shù)、pI和MW等；
   3、完整實驗報告，包括實驗步驟、使用儀器、軟件檢索參數(shù)等。
 
七、DIGE實驗案例

    DIGE定量分析結(jié)果。蛋白質(zhì)樣品經(jīng)過熒光染料標記后雙向電泳，ImageMaster7.0 (DIGE)分析差異點結(jié)果。
 
八、服務周期及收費標準：歡迎登陸 http://www.fitgene.com/  服務熱線 400-699-1663
  
九、質(zhì)量承諾：
   1、cy2作為內(nèi)標，確保定量的準確；
   2、提供客觀的DIGE實驗分析結(jié)果。
 

 
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