供應(yīng)MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒

MTT檢測(cè)試劑盒采用MTT經(jīng)典的方法。其實(shí)老師可能自己配制，而買現(xiàn)成的，主要是圖個(gè)省事。

MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒（MTT Cell Proliferation ａnd Cytotoxicity Assay Kit）被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的檢測(cè)。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan。在特定存在的情況下，可以被完全溶解。然后通過酶標(biāo)儀可以測(cè)定570nm波長(zhǎng)附近的吸光度。細(xì)胞增殖越多越快，則吸光度越高；細(xì)胞毒性越大，則吸光度越低。

使用說明：

1. MTT溶液拿出解凍。DMSO常溫存放，如果室溫過低（DMSO在20度以下會(huì)結(jié)冰），可放37度預(yù)熱解凍。
2. 通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。按照實(shí)驗(yàn)需要，進(jìn)行培養(yǎng)并給予0-10微升特定的藥物刺激。
3. 每孔加入10微升MTT溶液，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育4小時(shí)。
4. 每孔加入100微升DMSO，在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)再繼續(xù)孵育。直至全部溶解。通常37℃孵育4小時(shí)左右，紫色結(jié)晶會(huì)全部溶解。如果紫色結(jié)晶較小較少，溶解的時(shí)間會(huì)短一些。如果紫色結(jié)晶較大較多，溶解的時(shí)間會(huì)長(zhǎng)一些。
5. 在570nm測(cè)定吸光度。如無570nm濾光片，可以使用560-600nm的濾光片。

有些實(shí)驗(yàn)室條件不足，沒有酶標(biāo)儀，聽說用分光光度計(jì)來測(cè)，理論上沒什么不可以。但肯定得是用微孔比色皿，速度快一點(diǎn)。