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[谷氨酰胺內(nèi)切酶 金黃色葡萄球菌V8蛋白酶 天冬氨酸內(nèi)切酶]
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V8蛋白酶
EC:3.4.21.19
全名: 序列分析純V8蛋白酶;金黃色葡萄球菌V8蛋白酶
別名: V8蛋白酶;谷氨酰胺內(nèi)切酶;天冬酰胺內(nèi)切酶
儲(chǔ)存條件:凍干粉,2-8℃
來源:基因工程生產(chǎn),大腸桿菌表達(dá)。
1.產(chǎn)品簡介
V8蛋白酶屬于絲氨酸蛋白酶家族,能特異水解谷氨酸或天冬氨酸殘基羧基側(cè)肽鍵。在pH 7.8的NH4HCO3和pH 4.0的CH3COONH4緩沖液中識(shí)別并切割Glu羧基端肽鍵,在pH 7.8的鹽緩沖液中識(shí)別并切割Glu或Asp羧基端肽鍵,且對(duì)Glu的水解速率高于Asp。V8蛋白酶在pH4.0-10.0之間均有活性,最適pH為8.0-8.5。在進(jìn)行蛋白質(zhì)酶切測序、肽圖譜分析和肽質(zhì)量指紋圖譜分析中使用時(shí),可以單獨(dú)使用或與其他蛋白酶混合使用。V8蛋白酶的抑制劑有氟(DFP)、α2- 巨球蛋白和Nα-P-*-L-賴氨酸酮(TLCK)。
2.產(chǎn)品特性
單位定義:在25℃,pH7.8的條件下,每分鐘催化底物(Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide)生成1μmol(4-nitroaniline)所需要的酶量為一個(gè)酶活性單位。 來源 重組大腸桿菌 產(chǎn)品外觀 白色、類白色、類黃色粉末 比活 ≥ 5.0 AU /mg pro. 蛋白電泳 單一主條帶 分子量 24.0±2.4 kDa
比活性:25°C時(shí),以Z-Phe-Leu-Glu-4-nitranilide為底物測得的活性約為20 U/mg pro.(對(duì)應(yīng)于37°C時(shí),以酪蛋白為底物的活性約為500 U/mg pro)。
3.儲(chǔ)存和運(yùn)輸穩(wěn)定性
儲(chǔ)存穩(wěn)定性:重組V8蛋白酶凍干粉存于2-8℃,24個(gè)月穩(wěn)定;
溶解后穩(wěn)定性:用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于-20℃ 以下(1mg/ml),6個(gè)月穩(wěn)定;用水或50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于4℃(1mg/ml,無菌),2個(gè)月穩(wěn)定;用50mM Tris-HCl pH8.0溶解以后存于25℃或37℃(0.5mg/ml)12h,活性可維持85%以上;溶解后溶液可反復(fù)凍融10次無活性損失。
運(yùn)輸穩(wěn)定性:藍(lán)冰保溫運(yùn)輸,活性穩(wěn)定。
4.推薦使用方法
1)使用前注意
可按使用量分裝以限度避免污染或自切。
2)目的蛋白溶解
用酶切buffer溶解目的蛋白,例如25-50mM NH4HCO3 pH7.8,若溶解度不好對(duì)目的蛋白變性,添加尿素、SDS、DTT或加熱。尿素和SDS對(duì)V8蛋白酶的影響見表一。
3)酶切
V8蛋白酶和目的蛋白推薦比例為1/20-1/100(W/W),25℃或37℃酶切2-18h。
表一:V8蛋白酶在含有不同濃度變性劑,尿素25℃2h,SDS25℃12h的穩(wěn)定性
(注:V8蛋白酶0.5mg/ml,50mM Tris-HCl pH8.0)
2)應(yīng)用舉例:重組V8酶切胰島素 變性劑 濃度 殘余酶活 不添加 0 尿素 2M 95% 5M 12% 8M 0 SDS 0.1% 90% 0.5% 80% 1% 50%
100 μl胰島素溶液+198 μl 0.4 M Tris-HCl pH8.0+60 μl 0.1%V8蛋白酶液+超純水補(bǔ)至400 μl。37 ℃水浴反應(yīng)2 h,加6 μl溶液終止反應(yīng),C18柱分析:
A:酶切之前 B:酶切之后

5.產(chǎn)品優(yōu)勢
序列分析純蛋白酶:特異性高,穩(wěn)定性好。
無動(dòng)物源性:重組生產(chǎn),無外源性的病毒污染,生產(chǎn)過程不使用任何動(dòng)物源原料。
質(zhì)量穩(wěn)定:批量生產(chǎn),可保證穩(wěn)定連續(xù)的批次生產(chǎn);產(chǎn) 品批次間無差異,質(zhì)量穩(wěn)定。
純度高:比活高;宿主蛋白殘留小于生物制品限度要求。
凍干粉:易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸。
符合法規(guī)要求:生產(chǎn)設(shè)備和生產(chǎn)環(huán)境符合相關(guān)法規(guī)要求,生產(chǎn)過程完全遵循NSF ISO 9001:2008質(zhì)量體系并符合GMP指導(dǎo)原則。
質(zhì)量文件完整:按客戶需求,可提供相關(guān)法規(guī)支持文件。
6.相關(guān)產(chǎn)品
重組腸激酶;
序列分析純羧肽酶B;
序列分析純胰蛋白酶;
序列分析純糜蛋白酶。
標(biāo)簽: 谷氨酰胺 金黃色葡 天冬氨酸 谷氨酰胺內(nèi)切酶 金黃色葡萄球菌V8蛋白酶 天冬氨酸內(nèi)切酶 上海市v8蛋白酶 上海市v8蛋白酶廠家
注冊資金:100萬以下
聯(lián)系人:tang
固話:021-54336592
移動(dòng)手機(jī):18621016831
企業(yè)地址:上海市 上海市 徐匯區(qū)