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miRNA慢病毒包裝技術(shù)服務(wù) miRNA慢病毒包裝技術(shù)服務(wù)

miRNA慢病毒包裝技術(shù)服務(wù)

[慢病毒包裝

miRNA慢病毒

病毒包裝]

廣州市技術(shù)服務(wù)廠家

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[慢病毒包裝 miRNA慢病毒 病毒包裝]

miRNA慢病毒包裝技術(shù)服務(wù)
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miRNAmicroRNA)是一類近幾年在真核生物中發(fā)現(xiàn)的一類具有調(diào)控功能的非編碼RNA,長(zhǎng)度約20-24個(gè)核苷酸,是發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個(gè)堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,主要參與基因轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控。近來發(fā)現(xiàn)它們?cè)诠壍募?xì)胞增殖、死亡及脂肪代謝,線蟲極性的形成,哺乳動(dòng)物的造血干細(xì)胞的分化等過程中起了重要的調(diào)控作用。在植物中,miRNA還參與了葉子與花的發(fā)育過程。動(dòng)物(尤其是人)miRNA的生物合成過程已經(jīng)初步闡明:首先,miRNA基因的初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物(pri-miRNA)在細(xì)胞核中被RNaseIII Drosha切割成為前體miRNApre-miRNA),在最初的剪切后,pre-miRNA在轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白exportin-5的作用下由核內(nèi)轉(zhuǎn)到胞質(zhì)中,然后由另一種RNaseIII Dicer進(jìn)一步切割產(chǎn)生成熟的miRNA。這些成熟的miRNA與其他蛋白質(zhì)一起組成RISCRNA-induced silencing complex)復(fù)合體,從而引起靶mRNA的降解或者翻譯抑制。



miRNA過表達(dá)慢病毒服務(wù)流程


實(shí)驗(yàn)流程

優(yōu)勢(shì)

pre-miRNA策略

合成pre-miRNA構(gòu)建到含有mir30側(cè)翼雙臂序列的慢病毒過表達(dá)載體

直接合成,免去基因調(diào)取流程,易于通量化

pri-miRNA策略

從基因組中調(diào)取pri-miRNA后構(gòu)建到慢病毒過表達(dá)載體

保存miRNA天然雙臂



miRNA抑制慢病毒服務(wù) 

miRNA抑制劑(miRNA inhibitor)表達(dá)后則、特異地結(jié)合細(xì)胞內(nèi)成熟的靶miRNA,形成穩(wěn)定的復(fù)合物,阻止了miRNA對(duì)靶標(biāo)mRNA的降解或者翻譯抑制,上調(diào)miRNA靶標(biāo)基因的表達(dá)。


實(shí)驗(yàn)流程

優(yōu)勢(shì)

SiRNA抑制

采用U6或H1之類的POL III啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)抑制miRNA片段。

直接合成,免去基因調(diào)取流程

MiRNA

Sponge

采用串聯(lián)的多個(gè)miRNA互補(bǔ)序列形成吸附“海綿”

,可實(shí)現(xiàn)組織特異性表達(dá)



輝駿載體列表

miRNA載體

載體骨架元件

應(yīng)用

FT301

CMV-RFP-MCS-EF1-PURO

miRNA過表達(dá)

FT302

CMV-MCS-EF1-PURO

miRNA過表達(dá)

FT303

U6-MCS-CMV-EGFP

miRNA抑制

FT304

CMV-GFP-H1-MCS

miRNA抑制

注:此列表為常用miRNA載體樣板,更多載體骨架要求請(qǐng)咨詢客服??筛鶕?jù)客戶要求做啟動(dòng)子或者標(biāo)簽改造,個(gè)性化定制!


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