供應(yīng)腺病毒包裝技術(shù)

　　一、腺病毒包裝概述：
　　腺病毒（Adenovirus，Ad）的基因組為線形雙鏈DNA，長度約為36kb，被包裝在一個二十面體的蛋白質(zhì)外殼內(nèi)，可分為編碼區(qū)和非編碼區(qū)，一般適用于治   療的控制系統(tǒng)。
　　腺病毒包裝其主要原理是將目的片段克隆到腺病毒表達載體上，表達載體與腺病毒包裝質(zhì)粒通過重組后導(dǎo)入腺病毒包裝細胞進行包裝，包裝好的病毒進一步進行擴增和滴度測定。目前較常用的系統(tǒng)如Ad Easy，Ad Max，以及invotrogen的穿梭系統(tǒng)。不同的包裝系統(tǒng)其表達載體與包裝載體發(fā)生重組的方式，場所都有所不同，如Ad Easy 系統(tǒng)是在里發(fā)生重組的，重組的質(zhì)粒線性化后轉(zhuǎn)染細胞可包裝成腺病毒，Ad Max系統(tǒng)表達載體與包裝載體是在細胞中發(fā)生重組，invitrogen的穿梭系統(tǒng)則是體外重組。
　　
　　二、與傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)染方式相比，如脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、腺病毒感染具有以下特點：
　　1.可感染的細胞種類多，宿主范圍廣，幾乎可以感染所有類型的細胞。
　　2.感染效率高，特別適合質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染效率低的細胞，如原代培養(yǎng)細胞，神經(jīng)細胞等，且外源基因表達水平較高。
　　3.包裝外源基因的片段大，高達10kb.
　　4.腺病毒載體構(gòu)建及包裝容易操作，易于制備出滴度高的大量病毒。
　　5.當(dāng)腺病毒感染細胞后，病毒基因組存在于細胞染色體外，不整合到細胞染色體中，避免了因整合引起的基因突變及致癌基因，生物安全性高。
　　
　　三、腺病毒包裝服務(wù)內(nèi)容：
　　1.客戶提供插入片段信息；如序列、NCBI登錄號等；
　　2.將目的片段克隆到腺病毒表達載體上；
　　3.腺病毒包裝、擴增、滴度的測定；
　　4.實驗報告提交。
　　
　　四、客戶提供：
　　1.客戶提供腺病毒包裝的實驗方案；
　　2.若客戶只提供組織、細胞等樣本，還需提供目的基因NCBI登錄號，本公司將額外收取RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄費用；
　　3.對于本公司已有的載體和模版，免費提供。
　　
　　五、實驗報告內(nèi)容：
　　1.含目的片段的腺病毒一份，可直接用于轉(zhuǎn)染；
　　2.引物序列、載體圖譜一份、測序結(jié)果各一份；
　　3.腺病毒包裝實驗所需試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過程一份。
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