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酶底物法測定總大腸菌群的影響因素

培養(yǎng)溫度

總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測培養(yǎng)溫度需嚴格控制在35～37℃，培養(yǎng)溫度過高或過低均使檢測結(jié)果不準確。

培養(yǎng)時間

總大腸菌群培養(yǎng)16～20 h 的檢測結(jié)果與24 h相比均有顯著性差異( p＜0.05)，培養(yǎng)22、28 與 24 h 結(jié)果差異不顯著( p＞0.05)；而大腸埃希氏菌培養(yǎng) 16 ～22 h 的檢測結(jié)果與 24 h 相比均有顯著性差異( p＜0.05)，天津酶底物法封口機，培養(yǎng)28 h與24 h結(jié)果無顯著性差異( p＞0.05)。此方法對總大腸菌群的檢測培養(yǎng)時間在 22～28h之間可以得到準確結(jié)果，而大腸埃希氏菌的檢測則需24～28h；無論振蕩培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)對培養(yǎng)結(jié)果基本沒有影響。

程控定量封口機操作規(guī)程

1.將電源開關(guān)及機身背后開關(guān)打開，天津酶底物法封口機價格，橙黃色指示燈亮，儀器開始加熱。

2.10-30分鐘（時間受環(huán)境溫度及工作條件等因素影響）后，預(yù)熱完成，綠色指示燈亮，天津酶底物法封口機報價，儀器達到封口溫度可進行封口操作。

3.把裝有樣品和Colitech試劑的定量盤放置在進樣口。

4.向儀器方向輕輕推送定量盤，儀器感應(yīng)后會自動進樣，帶動其進入封口。

5.整個進樣過程大概持續(xù)15秒。定量盤封口完成后，會從儀器后方送出，從后方拿取定量盤即可。

6.如果有多個定量盤待封口，天津酶底物法封口機銷售，可進行連續(xù)封口，中間間隔十幾秒種即可。

7.如果遇到類似定量盤未放平就進樣的狀況，可點擊反轉(zhuǎn)按鈕進行儀器反轉(zhuǎn)。如果定量盤已完全進入儀器，則不可進行反轉(zhuǎn)操作。

8.使用完畢后，關(guān)閉儀器電源并拔下電源線。

酶底物法 （ enzyme substrate technique）的原理是 :利用大腸菌群能產(chǎn)生β2半乳糖苷酶 （β2D2galactosidase）分解 ON 2PG （O rtho2 nitrophenyl2β2D2galactopyranoside ） 使培養(yǎng)液呈黃色 ，檢測水樣中是否含有大腸菌群。利用大腸埃希菌產(chǎn)生 β2葡萄 糖 醛 酸 酶 （ β2glucuronidase ） 分 解 MUG （ 42 methyl2umbelliferyl2β2D2glucuronide）使培養(yǎng)液在波長 366 nm紫外光下產(chǎn)生藍色熒光 ， 檢測水樣中是否含有大腸埃希菌。酶底物法有商品化試劑供應(yīng) ，實驗操作簡便 ，無需確認試驗 ，可同時檢測水樣中大腸菌群和大腸埃希菌。如果改變培養(yǎng)溫度 ，還可檢測耐熱大腸菌群。該方法檢測周期短 ， 18 ～24 h 即可報告結(jié)果。可見該方法較大的特點是節(jié)省了時間和人力。