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供應BCA蛋白濃度測定試劑盒

武漢市測定試劑盒廠家

價格： 280

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可銷售總量： 0件

手機： 15308622976 郵箱： bio@biohao.com

傳真： 尚未完善 地址： 湖北武漢市

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詳細信息（供應BCA蛋白濃度測定試劑盒）

貨　　號：	P0130
名　　稱：	BCA蛋白濃度測定試劑盒
規(guī)　　格：	500微孔
價　　格：	280.00
#：

BCA蛋白濃度測定試劑盒使用說明

試劑盒組成	包裝(500微孔)	保存
BCA試劑	100ml	2-8℃
Cu試劑	3ml	2-8℃
PBS稀釋液	30ml	2-8℃
BSA蛋白標準 (5mg/ml BSA)	1ml	-20℃

本試劑盒自訂購之日起一年內(nèi)有效。本試劑盒用于酶標板或者200ul比色皿時可做500孔。當使用2ml比色皿時可做50孔，如果是1ml比色皿時可做100孔。
產(chǎn)品簡介
堿性條件下，蛋白將Cu2+還原為Cu+， Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡合物，測定其在562nm處的吸收值，并與標準曲線對比，即可計算待測蛋白的濃度。常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測結(jié)果，但受螯合劑(EDTA，EGTA)、還原劑（DTT，巰基）和脂類的影響。實驗中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用Bradford蛋白濃度測定試劑盒。
使用說明
一，微孔酶標儀法
1.         配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2.         稀釋標準品：取10微升BSA標準品用PBS稀釋至100微升（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。將標準品按0, 2, 4，6，8, 12, 16, 20微升加到96孔板的蛋白標準品孔中，加PBS補足到20微升。
3.         將樣品作適當稀釋（多做幾個梯度，如作2倍、4倍、8倍稀釋），加20微升到96孔板的樣品孔中。由于移液器在取小量時的誤差，標準線前面的點可能不很準確，所以盡可能的讓樣品點落在標準線1/2后。
4.         各孔加入200微升BCA工作液，37℃放置15-30分鐘。用酶標儀測定A562nm，根據(jù)標準曲線計算出蛋白濃度。使用溫箱孵育時，應注意防止因水分蒸發(fā)影響檢測結(jié)果。

二，分光光度計法、
如沒有酶標儀，可用分光光度計在離心管中混勻后加入比色皿中比色。
步驟如下：
1．配制工作液: 根據(jù)標準品和樣品數(shù)量，按50體積BCA試劑加1體積Cu試劑（50:1）配制成BCA工作液，充分混勻(混合時可能會有渾濁，但混勻后就會消失)。BCA工作液室溫24小時內(nèi)穩(wěn)定。
2，  稀釋標準品：取100微升BSA標準品用PBS稀釋至1ml（樣品一般可用PBS稀釋），使終濃度為0.5mg/ml。
3，  取八支（或者更多）5ml離心管，標讓號，按下表加入試劑。

離心管號	1	2	3	4	5	6	7（樣品管1）	8（樣品管2）	9（樣品管3）
標準蛋白BSA	0	40ul	80ul	120ul	160ul	200ul	200ul適當稀釋的樣品1	200ul適當稀釋的樣品2	……
PBS	200ul	160ul	120ul	80ul	40ul	0	0	0	0
BCA工作液	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml	2ml