腺病毒相關(guān)載體-武漢友名生物公司(圖)

20世紀(jì)初孟德爾的工作被重新發(fā)現(xiàn)以后，他的定律又在許多動植物中得到驗證。1909年丹麥學(xué)者W.L.約翰森提出了基因這一名詞，用它來指任何一種生物中控制任何性狀而其遺傳規(guī)律又符合于孟德爾定律的遺傳因子，并且提出基因型和表現(xiàn)型這樣兩個術(shù)語，前者是一個生物的基因成分，后者是這些基因所表現(xiàn)的性狀。

1910年美國遺傳學(xué)家兼胚胎學(xué)家T.H.摩爾根在果蠅中發(fā)現(xiàn)白色復(fù)眼（white eye， W）突變型，首先說明基因可以發(fā)生突變，而且由此可以知道型基因W+具有使果蠅的復(fù)眼發(fā)育成為紅色這一生理功能。1911年摩爾根又在果蠅的X連鎖基因白眼和短翅兩品系的雜交子二代中，發(fā)現(xiàn)了白眼、短翅果蠅和正常的紅眼長翅果蠅，首先指出位于同一染色體上的兩個基因可以通過染色體交換而分處在兩個同源染色體上。交換是一個普遍存在的遺傳現(xiàn)象，不過直到20世紀(jì)40年代中期為止，還從來沒有發(fā)現(xiàn)過交換發(fā)生在一個基因內(nèi)部的現(xiàn)象。因此當(dāng)時認(rèn)為一個基因是一個功能單位，也是一個突變單位和一個交換單位。

腺病毒呈無囊膜的球形結(jié)構(gòu)，其病毒粒子在感1染的細(xì)胞核內(nèi)常呈晶格狀排列，每個病毒顆粒包含一個36 kb的線性雙鏈DNA，兩端各有一個100~600 bp的反向末端重復(fù)序列(inverted terminal re-pea，t ITR)， ITR的內(nèi)側(cè)為病毒包裝信號，是病毒包裝所需要的順式作用元件?；蚪M包含早期表達(dá)的與腺病毒copy相關(guān)的E1~E4基因和晚期表達(dá)的與腺病毒顆粒組裝相關(guān)的L1~L5基因。

線狀雙股DNA與蛋白形成直徑為60~65 nm的髓芯，被包裹于衣殼內(nèi)。衣殼呈二十面體對稱，由252個直徑8~10 nm的殼粒組成，殼粒排列在三角形的面上，每邊6個，其中240個為六鄰體(非頂點殼粒) ，另12個為五鄰體基底(頂點殼粒)。每個六鄰體是六鄰體蛋白的同源三聚體，三聚體的六鄰體分子有一個三角形的塔尖和五面體的基底，塔區(qū)由4個環(huán)構(gòu)成即loop1、loop2、loop3、loop4，基底包含兩個區(qū)域P1、P2區(qū)[3]。六鄰體上的表位(epitope)是診斷不同血1清型的標(biāo)準(zhǔn)，它包括哺乳動物腺病毒屬的抗原成分，是病毒體對免1疫選擇壓力敏感的部位。

每個五鄰體基底上結(jié)合著1根(哺乳動物腺病毒)或2根(禽腺病毒)長9~77. 5 nm的纖維突起，這些纖維以五鄰體蛋白為基底由衣殼面伸出，纖維形成頭節(jié)區(qū)，纖突有血1清特異性，且含有負(fù)責(zé)體外血細(xì)胞凝集的種屬特異性抗原決定位點。

? ?轉(zhuǎn)1基因技術(shù)是伴隨著對生物體的認(rèn)識才發(fā)展起來的技術(shù)，在生物本身還未完完全全地認(rèn)識的情況下進行基因?qū)哟蔚男揎?，出現(xiàn)預(yù)料不到的結(jié)果和不確定性與不能解釋的情況是肯定的。其造成各種不確定性的來源包括: ? ?基因從原有機體轉(zhuǎn)人宿主有機體中，兩者的生理的差異對終產(chǎn)物影響而導(dǎo)致的性問題。

?? ?轉(zhuǎn)移的基因結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。確保經(jīng)遺傳修改的生物已獲得要表達(dá)良性性狀所需的小DNA部分片段，由于DNA結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定有助于性狀表達(dá)的穩(wěn)定，額外的DNA部分片段可能導(dǎo)致基因沉默或終產(chǎn)物的表達(dá)不穩(wěn)定，甚至產(chǎn)生不需要的性狀或有毒物質(zhì)。 ? ?基因插人受體基因組的位置和拷貝數(shù)的不確定性。無論是農(nóng)桿1菌介導(dǎo)法、基因法、花粉管通道法、PEG介導(dǎo)電1擊法等，質(zhì)粒在進人宿主基因組的位置與數(shù)量均是不確定的，目的基因的表達(dá)量難以預(yù)料，同一批的轉(zhuǎn)1基因材料可能存在差異。

?? ?轉(zhuǎn)1基因載體引起的不確定性。食用具抗生1素耐藥性的選擇性標(biāo)識基因可能會影響人的抗病能力。Netherwood等分別讓7個腸道炎的和12個健康的志愿者食用添加轉(zhuǎn)1基因大豆(EPSPS)的漢堡和豆奶昔，腺病毒相關(guān)載體，雖然在12個健康個體的糞便中沒有發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)1基因，但在7個腸道炎志愿者的xiao腸中都發(fā)現(xiàn)了轉(zhuǎn)1基因，其中的3個出現(xiàn)有轉(zhuǎn)1基因向腸道微生物轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象，即有可能抗生1素標(biāo)記會轉(zhuǎn)移到腸道微生物上。