價(jià)格: 電議
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[Pfu DNA聚合酶 Pfu聚合酶 Pfu酶]
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同科生物為您提供分子克隆領(lǐng)域所需全線(xiàn)產(chǎn)品,包含基因重組/克隆、電泳檢測(cè)、核酸提取/純化、PCR/qPCR/RT-PCR以及細(xì)胞因子等系列產(chǎn)品,各類(lèi)產(chǎn)品均得到客戶(hù)高度認(rèn)可,且反饋良好。同科生物本公司為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品的同時(shí),產(chǎn)品價(jià)格也較有競(jìng)爭(zhēng)力,尤其是促銷(xiāo)季節(jié)產(chǎn)品價(jià)格有明顯優(yōu)勢(shì),目前我公司各類(lèi)產(chǎn)品均有免費(fèi)試用申請(qǐng),歡迎試用,咨詢(xún)熱線(xiàn)400-055-6588。
分子生物學(xué)產(chǎn)品購(gòu)買(mǎi)和相關(guān)技術(shù)服務(wù)請(qǐng)認(rèn)準(zhǔn)同科生物,以十年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗(yàn),可為您提供優(yōu)惠的產(chǎn)品,及相關(guān)的技術(shù)服務(wù),您可放心購(gòu)買(mǎi)
產(chǎn)品名稱(chēng):FlashPfu DNA 聚合酶
英文名稱(chēng):FlashPfu DNA Polymerase
產(chǎn)品規(guī)格:
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 產(chǎn)品價(jià)格 |
| TK01123 | 250U/管 | ¥700 |
| TK01125 | 500U/管 | ¥1200 |
產(chǎn)品描述:同科FlashPfu 高保真DNA 聚合酶通過(guò)融合特殊持進(jìn)能力增強(qiáng)因子與精心改造過(guò)的pfu DNA聚合酶,是來(lái)源于超嗜熱古的DNA聚合酶。該酶具有5'→3' 聚合酶活力, 3'→5' 核酸外切酶活力,并產(chǎn)生平頭末端產(chǎn)物。由于其具有的3'→5' 核酸外切酶活力(校正活力),使得PCR能獲得很好的保真性,F(xiàn)lashPfu DNA聚合酶的錯(cuò)配率約為T(mén)aq DNA聚合酶的1/50。FlashPfu DNA聚合酶的最快延伸速率可達(dá)5?6 kb/min,對(duì)于復(fù)雜模板也可達(dá)到2 kb/min。
特點(diǎn)與應(yīng)用:
1、高保真PCR——保真性為T(mén)aq DNA聚合酶的50倍
2、快速PCR——延伸速度15?30 s/kb
3、長(zhǎng)片段PCR——基因組DNA ≤ 19 kb,λ DNA ≤ 30kb
4、生成用于平頭末端克隆的PCR產(chǎn)物
5、定點(diǎn)突變
活力單位定義:75°C、30分鐘內(nèi)使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定義為1個(gè)活性單位(U)。
儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存于-20℃。
注意事項(xiàng):
1、請(qǐng)等2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)完全溶解后再配制PCR反應(yīng)體系。
2、為了獲得較好的擴(kuò)增效果,擴(kuò)增前的所有操作請(qǐng)?jiān)诒线M(jìn)行。在室溫下,聚合酶活力可能會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。并且請(qǐng)將FlashPfu DNA Polymerase最后加入反應(yīng)體系,以避免酶的3’→5’核酸外切酶活力導(dǎo)致引物降解。
3、本產(chǎn)品擴(kuò)增產(chǎn)物的克隆請(qǐng)按照平頭末端克隆方法操作。
4、引物設(shè)計(jì):
1)引物Tm值計(jì)算請(qǐng)使用最鄰近法。請(qǐng)不要使用其他計(jì)算方法,它們計(jì)算得到的Tm值偏低,不適合本產(chǎn)品。
2)引物長(zhǎng)度控制在20?35堿基,并且Tm > 60°C。
3)引物的GC含量盡量控制在40?60%。
4)在引物3’端以G或C結(jié)尾,可提高引物和模板結(jié)合效率。但是要避免3’端避免有多個(gè)G或C,防止非特異性結(jié)合。
5)正、反引物的Tm之差不要大于5°C。
6)正、反向引物的3’端避免相互互補(bǔ)。
7)擴(kuò)增長(zhǎng)片段時(shí),引物長(zhǎng)度控制在25?35堿基。
8)進(jìn)行定點(diǎn)突變時(shí),請(qǐng)將錯(cuò)配堿基靠近5’端。若錯(cuò)配堿基靠近3’端,可能會(huì)受本酶校正。
不要使用含有尿嘧啶和次黃嘌呤核苷的引物。
應(yīng)用舉例:對(duì)于復(fù)雜模板的極限延伸速度
步驟1. 按下表所示,在50 ?l PCR體系中加入100 ng人基因組:
| 成分 | 體積 | 終濃度 |
| 2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+) | 25 μl | 1× |
| 2.5 mM dNTP | 4 μl | 0.2 mM each |
| 10 μM Forward Primer | 2.5 | 0.5 μM |
| 10 μM Reverse Primer | 2.5 | 0.5 μM |
| FlashPfu DNA Polymerase | 1.0 μl | 1 U |
| Nuclease-free water | To 50 μl |
|
| 100 ng/μl human genomic DNA | 1 μl | 100 ng/50 μl |
步驟2. 設(shè)置PCR程序:
| 2步法 | |||
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán) |
| 預(yù)變性 | 98°C | 3 min | 1 |
| 變性 | 98°C | 10 sec | 30 |
| 延伸 | 72°C | X min | |
延伸時(shí)間:
X= 1 min (10 s/kb)
1.5 min (15 s/kb)
2 min (20 s/kb)
3 min (30 s/kb)
該案例中所用的引物:
6 kb β-globin target
FP: ACAAGGGCTACTGGTTGCCGATTTTTATTG
RP: GGGACTGGCCTCAGAGGAAACTTCAGG
案例結(jié)果電泳圖:
同科生物簡(jiǎn)介:成立于2007年,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和技術(shù)服務(wù)于一體專(zhuān)注于生命醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)。主營(yíng)業(yè)務(wù)有科研產(chǎn)品、診斷試劑、分子診斷和技術(shù)服務(wù)等,主要服務(wù)于科研機(jī)構(gòu)、大專(zhuān)院校、和工業(yè)等客戶(hù)。
生產(chǎn)科研:同科生物搭建多個(gè)研發(fā)與合作技術(shù)平臺(tái)(博士后實(shí)踐基地、院士工作站、同濟(jì)大學(xué)人才培養(yǎng)與產(chǎn)學(xué)研合作基地及生物研究中心等),為技術(shù)創(chuàng)新提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)保障。擁有三類(lèi)體外試劑生產(chǎn)中心、儀器生產(chǎn)中心、研發(fā)質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室等、廠(chǎng)房和實(shí)驗(yàn)面積達(dá)8000多平米,儀器設(shè)備設(shè)施齊全(包括定量PCR儀、生物安全柜、核酸蛋白測(cè)定儀、高壓細(xì)胞破碎儀、FPLC等系列高端精密儀器設(shè)備)。
研發(fā)團(tuán)隊(duì):同科擁有一支由中科院院士為顧問(wèn),國(guó)家千人為科學(xué)家,以博士碩士為主體的的國(guó)際化研發(fā)團(tuán)隊(duì)。研發(fā)人員專(zhuān)業(yè)涵蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、學(xué)、藥物制劑、生物技術(shù)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、生物工程領(lǐng)域,關(guān)聯(lián)性較大,專(zhuān)業(yè)結(jié)構(gòu)合理,且形成互補(bǔ),在重大項(xiàng)目及關(guān)鍵技術(shù)上具備的攻關(guān)能力。
倉(cāng)儲(chǔ)物流:在全國(guó)布局多個(gè)倉(cāng)儲(chǔ)基地,貨品齊全,全國(guó)發(fā)貨,及時(shí)給力!
技術(shù)支持:專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),及時(shí)的技術(shù)指導(dǎo),協(xié)助客戶(hù)解決實(shí)驗(yàn)難題,愿意與您建立長(zhǎng)期的合作關(guān)系。
標(biāo)簽: Pfu Pfu聚 Pfu酶 Pfu DNA聚合酶 Pfu聚合酶 Pfu酶 上海市聚合酶 上海市聚合酶廠(chǎng)家注冊(cè)資金:500萬(wàn)-1000萬(wàn)
聯(lián)系人:孟小姐
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