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FlashPfu DNA聚合酶價(jià)格,報(bào)價(jià),說(shuō)明書(shū)|同科生物

[Pfu DNA聚合酶

Pfu聚合酶

Pfu酶]

上海市聚合酶廠(chǎng)家

價(jià)格: 電議

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[Pfu DNA聚合酶 Pfu聚合酶 Pfu酶]

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  • 分類(lèi):
  • 級(jí)別: 試驗(yàn)試劑LR
  • 含量: 詳情電聯(lián)
  • 產(chǎn)品規(guī)格: 250U/管
  • CAS: 詳情電聯(lián)

同科生物為您提供分子克隆領(lǐng)域所需全線(xiàn)產(chǎn)品,包含基因重組/克隆、電泳檢測(cè)、核酸提取/純化、PCR/qPCR/RT-PCR以及細(xì)胞因子等系列產(chǎn)品,各類(lèi)產(chǎn)品均得到客戶(hù)高度認(rèn)可,且反饋良好。同科生物本公司為客戶(hù)提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品的同時(shí),產(chǎn)品價(jià)格也較有競(jìng)爭(zhēng)力,尤其是促銷(xiāo)季節(jié)產(chǎn)品價(jià)格有明顯優(yōu)勢(shì),目前我公司各類(lèi)產(chǎn)品均有免費(fèi)試用申請(qǐng),歡迎試用,咨詢(xún)熱線(xiàn)400-055-6588

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產(chǎn)品名稱(chēng):FlashPfu DNA 聚合酶

英文名稱(chēng):FlashPfu DNA Polymerase

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品編號(hào)

產(chǎn)品規(guī)格

產(chǎn)品價(jià)格

TK01123

250U/管

700

TK01125

500U/管

1200

產(chǎn)品描述同科FlashPfu 高保真DNA 聚合酶通過(guò)融合特殊持進(jìn)能力增強(qiáng)因子與精心改造過(guò)的pfu DNA聚合酶,是來(lái)源于超嗜熱古的DNA聚合酶。該酶具有5'→3' 聚合酶活力, 3'→5' 核酸外切酶活力,并產(chǎn)生平頭末端產(chǎn)物。由于其具有的3'→5' 核酸外切酶活力(校正活力),使得PCR能獲得很好的保真性,F(xiàn)lashPfu DNA聚合酶的錯(cuò)配率約為T(mén)aq DNA聚合酶的1/50。FlashPfu DNA聚合酶的最快延伸速率可達(dá)5?6 kb/min,對(duì)于復(fù)雜模板也可達(dá)到2 kb/min。

特點(diǎn)與應(yīng)用

1、高保真PCR——保真性為T(mén)aq DNA聚合酶的50倍

2、快速PCR——延伸速度15?30 s/kb

3、長(zhǎng)片段PCR——基因組DNA ≤ 19 kb,λ DNA ≤ 30kb

4、生成用于平頭末端克隆的PCR產(chǎn)物

5、定點(diǎn)突變

活力單位定義:75°C、30分鐘內(nèi)使10 nmol的dNTP摻入酸不溶性沉淀物所需要的酶量,定義為1個(gè)活性單位(U)。

儲(chǔ)存條件:儲(chǔ)存于-20℃。

注意事項(xiàng)

1、請(qǐng)等2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)完全溶解后再配制PCR反應(yīng)體系。

2、為了獲得較好的擴(kuò)增效果,擴(kuò)增前的所有操作請(qǐng)?jiān)诒线M(jìn)行。在室溫下,聚合酶活力可能會(huì)產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。并且請(qǐng)將FlashPfu DNA Polymerase最后加入反應(yīng)體系,以避免酶的3’→5’核酸外切酶活力導(dǎo)致引物降解。

3、本產(chǎn)品擴(kuò)增產(chǎn)物的克隆請(qǐng)按照平頭末端克隆方法操作。

4、引物設(shè)計(jì):

1)引物Tm值計(jì)算請(qǐng)使用最鄰近法。請(qǐng)不要使用其他計(jì)算方法,它們計(jì)算得到的Tm值偏低,不適合本產(chǎn)品。

2)引物長(zhǎng)度控制在20?35堿基,并且Tm > 60°C。

3)引物的GC含量盡量控制在40?60%。

4)在引物3’端以G或C結(jié)尾,可提高引物和模板結(jié)合效率。但是要避免3’端避免有多個(gè)G或C,防止非特異性結(jié)合。

5)正、反引物的Tm之差不要大于5°C。

6)正、反向引物的3’端避免相互互補(bǔ)。

7)擴(kuò)增長(zhǎng)片段時(shí),引物長(zhǎng)度控制在25?35堿基。

8)進(jìn)行定點(diǎn)突變時(shí),請(qǐng)將錯(cuò)配堿基靠近5’端。若錯(cuò)配堿基靠近3’端,可能會(huì)受本酶校正。

不要使用含有尿嘧啶和次黃嘌呤核苷的引物。

應(yīng)用舉例:對(duì)于復(fù)雜模板的極限延伸速度

步驟1. 按下表所示,在50 ?l PCR體系中加入100  ng人基因組:

成分

體積

終濃度

2× FlashPfu PCR Buffer (with Mg2+)

25 μl

2.5 mM dNTP

4 μl

0.2 mM each

10 μM Forward Primer

2.5

0.5 μM

10 μM Reverse Primer

2.5

0.5 μM

FlashPfu DNA Polymerase

1.0 μl

1 U

Nuclease-free water

To 50 μl

 

100 ng/μl human genomic DNA

1 μl

100 ng/50 μl

步驟2. 設(shè)置PCR程序:

2步法

步驟

溫度

時(shí)間

循環(huán)

預(yù)變性

98°C

3 min

1

變性

98°C

10 sec

30

延伸

72°C

X min

延伸時(shí)間:

X= 1 min (10 s/kb)

1.5 min (15 s/kb)

2 min (20 s/kb)

3 min (30 s/kb)

該案例中所用的引物:

6 kb β-globin target

FP: ACAAGGGCTACTGGTTGCCGATTTTTATTG

RP: GGGACTGGCCTCAGAGGAAACTTCAGG

案例結(jié)果電泳圖:

同科生物簡(jiǎn)介:成立于2007年,是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷(xiāo)售和技術(shù)服務(wù)于一體專(zhuān)注于生命醫(yī)學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè)。主營(yíng)業(yè)務(wù)有科研產(chǎn)品、診斷試劑、分子診斷和技術(shù)服務(wù)等,主要服務(wù)于科研機(jī)構(gòu)、大專(zhuān)院校、和工業(yè)等客戶(hù)。

生產(chǎn)科研:同科生物搭建多個(gè)研發(fā)與合作技術(shù)平臺(tái)(博士后實(shí)踐基地、院士工作站、同濟(jì)大學(xué)人才培養(yǎng)與產(chǎn)學(xué)研合作基地及生物研究中心等),為技術(shù)創(chuàng)新提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)保障。擁有三類(lèi)體外試劑生產(chǎn)中心、儀器生產(chǎn)中心、研發(fā)質(zhì)檢實(shí)驗(yàn)室等、廠(chǎng)房和實(shí)驗(yàn)面積達(dá)8000多平米,儀器設(shè)備設(shè)施齊全(包括定量PCR儀、生物安全柜、核酸蛋白測(cè)定儀、高壓細(xì)胞破碎儀、FPLC等系列高端精密儀器設(shè)備)。

研發(fā)團(tuán)隊(duì):同科擁有一支由中科院院士為顧問(wèn),國(guó)家千人為科學(xué)家,以博士碩士為主體的的國(guó)際化研發(fā)團(tuán)隊(duì)。研發(fā)人員專(zhuān)業(yè)涵蓋生物化學(xué)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、學(xué)、藥物制劑、生物技術(shù)、遺傳學(xué)、微生物學(xué)、生物工程領(lǐng)域,關(guān)聯(lián)性較大,專(zhuān)業(yè)結(jié)構(gòu)合理,且形成互補(bǔ),在重大項(xiàng)目及關(guān)鍵技術(shù)上具備的攻關(guān)能力。

倉(cāng)儲(chǔ)物流:在全國(guó)布局多個(gè)倉(cāng)儲(chǔ)基地,貨品齊全,全國(guó)發(fā)貨,及時(shí)給力!

技術(shù)支持:專(zhuān)業(yè)的技術(shù)團(tuán)隊(duì),及時(shí)的技術(shù)指導(dǎo),協(xié)助客戶(hù)解決實(shí)驗(yàn)難題,愿意與您建立長(zhǎng)期的合作關(guān)系。

標(biāo)簽: Pfu Pfu聚 Pfu酶   Pfu DNA聚合酶 Pfu聚合酶 Pfu酶   上海市聚合酶   上海市聚合酶廠(chǎng)家
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