供應(yīng)Hoechst33258染色液
武漢市染色液廠家
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Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的藍(lán)色熒光染料，對(duì)細(xì)胞的毒性較低。
Hoechst 33258染色常用于細(xì)胞凋亡檢測(cè)，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Hoechst 33258也常用于普通的細(xì)胞核染色，或常規(guī)的DNA染色。
Hoechst 33258的激發(fā)波長(zhǎng)為346nm，發(fā)射波長(zhǎng)為460nm；Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后，激發(fā)波長(zhǎng)為352nm，發(fā)射波長(zhǎng)為461nm。
| 試劑盒組成 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| Hoechst 33258濃縮液（50X） | 1ml | -20℃避光 |
| Hoechst 33258稀釋液 | 50ml | 2-8℃ |
使用說明：
Hoechst 33258染色液染色液的配制：將Hoechst 33258濃縮液取出解凍，輕輕混勻，短時(shí)間離心，根據(jù)使用量，按照1ml33258稀釋液加入20ul33258濃縮液的比例配制，即成Hoechst 33258染色液。此配好的染色液深度為10ug/ml,如果感覺染色顏色比較深，可適當(dāng)?shù)南♂專ㄓ孟♂屢海?。此配好的染色液未用完可存放?/span>-20℃避光。
1. 對(duì)于固定的細(xì)胞或組織：
a. 對(duì)于細(xì)胞或組織樣品，固定后，適當(dāng)洗滌去除固定劑。隨后如果需要進(jìn)行熒光染色，則行熒光染色，染色完畢后再按后續(xù)步驟進(jìn)行Hoechst 33258染色。如果不需要進(jìn)行其它染色，則直接進(jìn)行后續(xù)的Hoechst 33258染色。
b. 對(duì)于貼壁細(xì)胞或組織切片，加入少量Hoechst 33258染色液，覆蓋住樣品即可。對(duì)于懸浮細(xì)胞，至少加入待染色樣品體積3倍的染色液，混勻。室溫放置3-5分鐘。
c. 吸除Hoechst 33258染色液，用TBST、PBS或生理鹽水洗滌2-3次，每次3-5分鐘。
d. 直接在熒光顯微鏡下觀察或封片后熒光顯微鏡下觀察。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí)，會(huì)看到凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核呈致密濃染，或呈碎塊狀致密濃染。
2. 對(duì)于活細(xì)胞或組織：
a. 加入適當(dāng)量Hoechst 33258染色液，必須充分覆蓋住待染色的樣品，通常對(duì)于六孔板一個(gè)孔需加入1ml染色液，對(duì)于96孔板一個(gè)孔需加入100微升染色液。
b. 在適宜于細(xì)胞培養(yǎng)的溫度培養(yǎng)20-30分鐘。棄染色液，用PBS或培養(yǎng)液洗滌2-3次即可進(jìn)行熒光檢測(cè)。 標(biāo)簽： 武漢市染色液 武漢市染色液廠家
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