供應(yīng)胰蛋白酶-EDTA消化液

別名：胰酶EDTA消化液

：胰蛋白酶、細(xì)胞培養(yǎng)、胰酶細(xì)胞消化液

產(chǎn)品編號：T1300

詳細(xì)介紹：在組織細(xì)胞的體外培養(yǎng)和原代細(xì)胞培養(yǎng)中的組織細(xì)胞分散（將組織塊制備成單個細(xì)胞懸液）和傳代細(xì)胞培養(yǎng)中，貼壁生長細(xì)胞的消化分散均要使用組織細(xì)胞消化液。常用的消化液為胰蛋白酶，EDTA，其功能主要是使細(xì)胞間的蛋白質(zhì)水解，使組織或細(xì)胞分散成單個細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液用于進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。

胰蛋白酶（Trypsin）簡稱胰酶，是由動物豬胰臟中提取的一種蛋白酶制劑。胰蛋白酶作用于與賴氨酸或精氨酸相連接的肽健，除去細(xì)胞間粘蛋白及糖蛋白，影響細(xì)胞骨架，打開細(xì)胞-細(xì)胞，細(xì)胞-基質(zhì)之間的連接從而使細(xì)胞從培養(yǎng)板上脫落下來并使細(xì)胞分散成單個細(xì)胞。胰蛋白酶液濃度越高，作用越強(qiáng)，但超過一定限度會損傷細(xì)胞。細(xì)胞消化用胰蛋白酶常用的工作濃度為0.25％，pH為7.2-7.4之間，用濾器過濾。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。注意EDTA不能被血清中和，使用后培養(yǎng)瓶要清洗，否則再培養(yǎng)時細(xì)胞容易脫壁。

胰蛋白酶液消化時間：2-10分鐘。用含血清培養(yǎng)液終止其對細(xì)胞的消化作用。

使用說明：1、貼壁細(xì)胞的消化：貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中長成致密單層后，繼續(xù)生長的空間不足，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成份也消耗較多，同時代謝廢物也有較多堆積，需要分瓶培養(yǎng)，擴(kuò)增、傳代。對于懸浮生長細(xì)胞和貼壁不太緊的細(xì)胞如SP2/0，293等，可直接吹散后分瓶；而對于貼壁較緊的細(xì)胞如Hela，HepG2，CHO等，則需要以細(xì)胞消化液消化后，才能脫落和分散，擴(kuò)瓶。一般操作過程為（以下操作均必須嚴(yán)格按無菌操作的要求進(jìn)行）：
   （1）將長成致密單層細(xì)胞的細(xì)胞瓶中原來的培養(yǎng)液棄去； 
   （2）加入0.25％胰酶溶液，視細(xì)胞瓶的大小加入體積為0.5ml或更多（依培養(yǎng)器皿的大小而定），以使充分浸潤； 
   （3）一般消化時間約為1至3分鐘，肉眼觀察瓶底由半透明（細(xì)胞單層連接成片）轉(zhuǎn)為點(diǎn)狀透明（出現(xiàn)細(xì)小空隙）時，棄去細(xì)胞消化液，并加入適量的完全培養(yǎng)液終止消化，吹打分散；  
   （4）視實(shí)驗(yàn)?zāi)康姆秩攵嗥坷^續(xù)培養(yǎng)，一般比例為一傳二到一傳四的。 

2、組織的消化：不同的組織需要消化的時間相差很大，通常以消化后可以充分打散組織為宜。

注意事項(xiàng)：1．由于組織或細(xì)胞性質(zhì)不同，實(shí)驗(yàn)人員應(yīng)依據(jù)具體情況，確定消化時間；消化細(xì)胞時間不宜過長，否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況；

2、分裝胰蛋白酶-EDTA消化液的過程中要特別注意避免消化液被污染；

3、胰蛋白酶-EDTA消化液建議-20℃保存，切忌反復(fù)凍融，

4、為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套進(jìn)行試驗(yàn)操作。

相關(guān)產(chǎn)品：

產(chǎn)品編號                產(chǎn)品名稱                    規(guī)格         價格

T1300    胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)不含酚紅     100ml         90.00

T1320     胰蛋白酶－EDTA消化液(0.25%)含酚紅      100ml        90.00

T1350      胰蛋白酶消化液(0.25%)不含酚紅         100ml         90.00

  P1400       青鏈霉素混合液（雙抗）(100×)         100ml         90.00

  P8370         細(xì)胞分離液（Pharmacia）             100ml        600.00

  P8610         人外周血淋巴細(xì)胞分離液             200ml         150.00

  P8670          人外周血白細(xì)胞分離液              200ml         480.00

  (各種淋巴細(xì)胞分離液均有貨，可直接咨詢)

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H1090         1M Hepes溶液(Free Acid，無菌)      100ml/500ml    240/900

3008                細(xì)胞鏟子（costar）              1.9cm       25.00/把

430720               培養(yǎng)瓶（corning）             75CM2        80.00