快切酶-友名生物(推薦商家)

DNA限制性內(nèi)切酶酶切是一項(xiàng)基于DNA限制性內(nèi)切酶的基因工程技術(shù)，其基本原理是利用限制性內(nèi)切酶對(duì)DNA上特定序列的識(shí)別，來確定切割位點(diǎn)并實(shí)現(xiàn)切割，從而獲得所需的特定序列。

生物體內(nèi)能識(shí)別并切割特異的雙鏈DNA序列的一種內(nèi)切核酸酶。它是可以將外來的DNA切斷的酶，即能夠限制異源DNA的侵入并使之失去活力，但對(duì)自己的DNA卻無損害作用，這樣可以保護(hù)細(xì)胞原有的遺傳信息。由于這種切割作用是在DNA分子內(nèi)部進(jìn)行的，故名限制性內(nèi)切酶（簡稱限制酶）。

限制酶分布區(qū)域

限制性核酸內(nèi)切酶分布極廣，幾乎在所有的屬、種中都發(fā)現(xiàn)至少一種限制性內(nèi)切酶，快切酶，多者在一屬中就有幾十種，例如在嗜血桿1菌屬中（Haemophilus）現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)的就有22種。有的菌株含酶量極低，很難分離定性；然而在有的菌株中，酶含量極高．如E. coli的pMB4(EcoRI酶）和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶）就是高產(chǎn)酶菌株。據(jù)報(bào)道從10g的H. aegyptius的細(xì)胞中，能分離提純出可消化l0gλ噬菌體DNA的酶量。是限制性內(nèi)切酶，尤其是特異性非常強(qiáng)的I類限制性內(nèi)切酶的主要來源。

限制酶的限制作用實(shí)際就是限制酶降解外源DNA ，維護(hù)宿主遺傳穩(wěn)定的保護(hù)機(jī)制。Methylation是常見的修飾作用，可使腺piao呤A和胞嘧1啶C Methylation而受到保護(hù)。通過甲1基化作用達(dá)到識(shí)別自身遺傳物質(zhì)和外來遺傳物質(zhì)的目的。

所以，能產(chǎn)生防御病毒侵染的限制酶的，其自身的基因組中可能有該酶識(shí)別的序列，只是該識(shí)別序列或酶切位點(diǎn)被Methylation了。但并不是說一旦Methylation了，所有限制酶都不能切割。大多數(shù)限制酶對(duì)DNAMethylation敏感，因此當(dāng)限制酶目標(biāo)序列與Methylation位點(diǎn)重疊時(shí)，對(duì)酶切的影響有3種可能，即不影響、部分影響、完全阻止。

對(duì)MethylationDNA的切割能力是限制酶內(nèi)在和不可預(yù)測的特性，因此，為有效的切割DNA，必須同時(shí)考慮DNA Methylation和限制酶對(duì)該類型Methylation的敏感性。另外，大部分商業(yè)限制酶如今專門用于切割Methylation DNA。