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單核苷酸多態(tài)性( SNP )實驗

SNP (Single Nucleo Polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)致的核酸序列多態(tài)性(Polymorphism)。據(jù)估計，在人類基因組中，大約每千個堿基中有一個SNP ，無論是比較于度多態(tài)性(RFLP)分析還是微標(biāo)記(STR) ，都要廣泛得多。

實驗方法原理:

SNP (Single Nucleo Polymorphisn即單核苷酸多態(tài)性，是由于單個核苷酸改變而導(dǎo)致的核酸序列多態(tài)性(Polymorphism)。據(jù)估計，在人類基因組中，大約每千個堿基中有一個SNP ，無論是比較于限制性段長度多態(tài)性(RFLP)分析還是微標(biāo)記(STR) ，都要廣泛得多。SNP是我們考察遺傳變異的單位，據(jù)估計，人類的所有群體中大約存在一千萬個SNP位點。-般認(rèn)為，分子生物學(xué)服務(wù)，相鄰的SNPs傾向于一起遺傳給后代。于是，我們把位于染色體上某一區(qū)域的一組相關(guān)聯(lián)的SNP等位位點稱作單體型( haplotype b大多數(shù)染色體區(qū)域只有少數(shù)幾個常見的單體型(每個具有至少5%的頻率)，它們代表了一個群體中人與人之間的大部分多態(tài)性。-個染色體區(qū)域可以有很多SNP位點，分子生物檢測，但是我們一-旦掌握了這個區(qū)域的單體型，就可以只使用少數(shù)幾個標(biāo)簽SNPs(tagSNP)來進行基因分型，獲取大部分的遺傳多態(tài)模式。

ELISA 是一種結(jié)合抗原、抗ti特異性反應(yīng)和酶對底物高xiao催化作用的高敏感性免yi學(xué)實驗技術(shù)。ELISA 的基礎(chǔ)是抗原或抗ti的固相化及抗原或抗ti的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗ti仍保持其免yi學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗ti既保留其免yi學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本(測定其中的抗ti或抗原)與固相載體表面的抗原或抗ti起反應(yīng)，洗滌使固相載體上形成的抗原抗ti復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗ti，通過反應(yīng)使其結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶含量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，南京分子生物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

免yi共沉淀（Co-IP檢測）是以抗ti和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的方法。當(dāng)細(xì)胞在非變性條件下被裂解時，完整細(xì)胞內(nèi)存在的許多蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)間的相互作用也被保留下來。用預(yù)先固化在beads上的蛋白質(zhì)A的抗ti免yi沉淀A蛋白，那么與A蛋白在體內(nèi)結(jié)合的蛋白質(zhì)B也能一起沉淀下來，再通過蛋白變性分離，對B蛋白進行檢測，進而證明兩者間的相互作用。

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