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前l(fā)ie腺素E2對大鼠巨噬細(xì)胞株NR8383 合成血管內(nèi)皮生長因子促進人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞成管、遷移的影響
方法:分別采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受體抑zhi劑6809+10 nmol/L EP4受體抑zhi劑23848 處理的NR8383 細(xì)胞作為各實驗組,選擇未經(jīng)PGE2以及其特異性受體抑zhi劑處理的NR8383 細(xì)胞作為對照組,采用Western blot 和qPCR方法檢測各組NR8383細(xì)胞內(nèi)VEGF蛋白以及mRNA的表達水平;收集以上各處理組的細(xì)胞培養(yǎng)上清液分別刺激1HUVECs,運用TRANSWELL 小室、Matrigel 膠細(xì)胞成管實驗等實驗方法,觀察PGE2調(diào)控巨噬細(xì)胞對HUVEC 遷移效應(yīng)和成管能力的影響。
結(jié)果:隨著NR8383 細(xì)胞培養(yǎng)液中加入PGE2濃度增gao,其 VEGF蛋白表達和VEGF mRNA的表達水平顯著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2處理過的NR8383細(xì)胞培養(yǎng)上清液可以顯著增加HUVEC細(xì)胞形成的小管面積,動物模型實驗,形成小管面積隨著PGE2處理濃度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的遷移運動也隨著PGE2處理濃度的升高不同程度的增強,動物模型,HUVECs趨化的數(shù)量顯著升高(P<0.05);研究發(fā)現(xiàn)PGE2特異性的EP2/EP4 受體拮抗劑6809/23848,動物模型構(gòu)建公司,可以顯著抑制PGE2 增強NR8383 細(xì)胞內(nèi)VEGF mRNAs 表達的作用并且也顯著抑制PGE2 增強 NR8383細(xì)胞促進HUVECs成管和趨化能力的效應(yīng)(P<0.05)。

正確地評估動物疾病模型
應(yīng)該懂得沒有一種動物模型能完疾病真實情況,動物畢竟不是人體的縮影。模型實驗只是一種間接性研究,只可能在一個局部或幾個方面與人類疾病相似。因此,模型實驗結(jié)論的正確性只是相對的,終必須在人體身上得到驗證。過程中一旦出現(xiàn)與人類疾病不同的情況,必須分析其分岐范圍和程度,找到相平行的共同點,正確評估哪些是有價值的。

動物模型的設(shè)計原則
適用性和可控性
供醫(yī)學(xué)實驗研究用的動物模型,在時,動物模型購買,應(yīng)盡量考慮到今后臨床應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展,以利于研究的開展。如雌能終止大鼠和小鼠的早期,但不能終止人的。因此,選用雌大鼠和小鼠終止早期的模型是不適用的,因為在大鼠和小鼠篩選帶有雌活性的時,常常會發(fā)現(xiàn)這些能終止,似乎可能是有效的避孕藥,但一旦用于人則并不成功。所以,如果知道一個化合物具有雌活,用這個化合物在大鼠或小鼠觀察終止的作用是沒有意義的。又如選用大小鼠作作實驗性腹膜炎就不適用,因為它們對革蘭氏陰性具有較高的抵抗力,很不容易造成腹膜炎。有的動物對某致病因子特別敏感,極易,也不適用。如狗腹腔注射糞便濾液引起腹膜炎很快( 80%24 小時內(nèi)),來不及做實驗觀察,而且糞便劑量及菌株不好控制,因此不能準(zhǔn)確重復(fù)實驗結(jié)果。

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