小鼠動物實驗外包-英瀚斯-南京動物實驗外包

前l(fā)ie腺素E2對大鼠巨噬細(xì)胞株NR8383 合成血管內(nèi)皮生長因子促進(jìn)人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞成管、遷移的影響

　　方法：分別采用0.1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2、1 nmol/L PGE2+10 nmol/L EP2受體抑zhi劑6809+10 nmol/L EP4受體抑zhi劑23848 處理的NR8383 細(xì)胞作為各實驗組，選擇未經(jīng)PGE2以及其特異性受體抑zhi劑處理的NR8383 細(xì)胞作為對照組，采用Western blot 和qPCR方法檢測各組NR8383細(xì)胞內(nèi)VEGF蛋白以及mRNA的表達(dá)水平；收集以上各處理組的細(xì)胞培養(yǎng)上清液分別刺激1HUVECs，運(yùn)用TRANSWELL 小室、Matrigel 膠細(xì)胞成管實驗等實驗方法，觀察PGE2調(diào)控巨噬細(xì)胞對HUVEC 遷移效應(yīng)和成管能力的影響。

　　結(jié)果：隨著NR8383 細(xì)胞培養(yǎng)液中加入PGE2濃度增gao，其 VEGF蛋白表達(dá)和VEGF mRNA的表達(dá)水平顯著升高（P<0.05）；0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE2處理過的NR8383細(xì)胞培養(yǎng)上清液可以顯著增加HUVEC細(xì)胞形成的小管面積，形成小管面積隨著PGE2處理濃度的增加而增加（P<0.05）；HUVECs的遷移運(yùn)動也隨著PGE2處理濃度的升高不同程度的增強(qiáng)，HUVECs趨化的數(shù)量顯著升高（P<0.05）；研究發(fā)現(xiàn)PGE2特異性的EP2/EP4 受體拮抗劑6809/23848，可以顯著抑制PGE2 增強(qiáng)NR8383 細(xì)胞內(nèi)VEGF mRNAs 表達(dá)的作用并且也顯著抑制PGE2 增強(qiáng) NR8383細(xì)胞促進(jìn)HUVECs成管和趨化能力的效應(yīng)（P<0.05）。

　

小鼠膀胱ai原位瘤動物模型建立方法

膀胱灌注法通常采用對數(shù)生長期的MB49小鼠膀胱ai細(xì)胞株作為實驗材料，6-12周齡的雌性C57/BL6小鼠作為實驗動物。- -般膀胱內(nèi)灌注數(shù)量為:10^4-5*10^5個，10^4-10^5個， .5x10^6-4x10^6個。實驗中常通過導(dǎo)管對經(jīng)過膜處理后膀胱灌入細(xì)胞懸液--定時間后使細(xì)胞粘附于膀胱壁上，小鼠動物實驗外包，建立起小鼠原位膀胱ai模型。該方法簡便有效，成瘤率相對較高。但是在膀胱粘膜完整的情況下，發(fā)癌率- -般只有10%。為提高其移植成功率，外包一個動物實驗價格，研究者通常采用膀胱粘膜損傷技術(shù)進(jìn)行膀胱灌注。常用的膀胱損傷技術(shù)有電灼法，酸性溶液和胰蛋白酶灌注法(17-19)。該方法成瘤率高，具有很強(qiáng)的實用性，但是膀胱ai模型插管要求高，腫liu細(xì)胞容易外滲，并且膜損傷處理過后易發(fā)生膀胱內(nèi)發(fā)炎現(xiàn)象。

丙泊酚干預(yù)對大鼠視神經(jīng)損傷的影響

　方法： SD大鼠67只，隨機(jī)取20只為正常組，不予任何處理。余行視神經(jīng)鉗夾法造模，動物實驗外包公司，造模成功42只納入實驗。隨機(jī)分為：模型對照組和丙泊酚組，各21只/組。造模后4 d，以TUNEL法檢測大鼠視網(wǎng)mo和視神經(jīng)細(xì)胞凋亡，造模后7 d，RT-PCR、Western-blot檢測視wang膜和視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞組織pase-3、BCL-2基因和蛋白表達(dá)。造模后14 d，行閃光視覺誘發(fā)電位檢測，南京動物實驗外包，處死大鼠取眼球，觀察各組大鼠視wang膜和視神經(jīng)的病理形態(tài)，行視wang膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞計數(shù)。

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