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營養(yǎng)不良性gan硬化動物模型

(1)fu制方法 ?離乳雄性大鼠，每日喂食缺乏dan堿的低蛋白高脂肪飼料8～10g，連續(xù)2～3個(gè)月。該飼料用酪蛋白或大豆作為蛋白來源，另加蔗糖、豬油、維生素粉、鹽和定量的L-胱酸而組成。造模過程中，每日觀察動物的一般活動狀況，每周稱量動物體重，造模結(jié)束后抽取全血制備xue清、稱取部分肝組織制備勻漿作生化檢測，摘取一些qi官稱重，醫(yī)學(xué)動物實(shí)驗(yàn)外包，換算成臟器系數(shù)，并對肝組織進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)檢查。

(2)模型特點(diǎn) ?造模1個(gè)月時(shí)，約有20％動物si亡，2個(gè)月時(shí)，動物體重增長停止，有fu水潴留、出血、脫毛等現(xiàn)象出現(xiàn)，巨檢可見典型的肝結(jié)節(jié)、脾腫大、腹shui潴留、yi腺腫大、gao丸萎縮等特有癥狀，有的還出現(xiàn)shen硬化，光鏡檢查顯示，造模初期，肝組織呈小結(jié)節(jié)性脂肪gan硬化，隨著飼育時(shí)闖的延長，南京動物實(shí)驗(yàn)外包，出現(xiàn)粗大的結(jié)節(jié)性或小葉性gan硬化。

(3)比較醫(yī)學(xué) ?膳食不平衡或特種營養(yǎng)素缺乏可以導(dǎo)致動物肝細(xì)胞病變。實(shí)驗(yàn)證明，長期喂食dan堿缺乏食物可誘發(fā)大鼠肝脂變、肝纖維化乃至gan硬化。本模型采用離乳大鼠是由于幼鼠在發(fā)育期階段對dan堿的需求量較大，因dan堿缺乏造成對機(jī)體傷害的敏感性自然比成年動物更強(qiáng)。但事實(shí)上，對dan堿缺乏的敏感性取決于體內(nèi)dan堿氧化酶的含量。人類gan臟不含dan堿氧化酶，不存在dan堿缺乏問題，所以此模型不適于在發(fā)病機(jī)制上進(jìn)行人類相關(guān)疾病的研究。不過，該模型由于fu制周期長，飼料配制復(fù)雜，花費(fèi)大，現(xiàn)已少見有單用此方法造模者。此外，實(shí)驗(yàn)中使用雄性動物雄鼠是因?yàn)樾坌詣游镌谙騡an硬化轉(zhuǎn)化過程中比雌性動物更為均一。在飼料中混入微量的半胱氨酸具有促進(jìn)gan硬化發(fā)展的作用。

實(shí)驗(yàn)動物的選擇在此，提幾點(diǎn)原則和方法。

第①，做什么樣的實(shí)驗(yàn)？什么動物適合本實(shí)驗(yàn)？做什么實(shí)驗(yàn)，這是選題時(shí)就確定好了的?？隙ㄊ墙?jīng)過論證的。無需多講。用什么樣的動物呢？我想，大多是參照文獻(xiàn)，再結(jié)合自己對實(shí)驗(yàn)動物的了解。選題之時(shí)就肯定閱讀過很多文獻(xiàn)了，因此不會陌生。

如：做高、動脈粥樣硬化，我想大多數(shù)人會選擇大鼠、兔子，也可以選金黃地鼠、，少數(shù)人會選小鼠，但我想用狗和猴的基本上不會有吧。因?yàn)橐x擇比較容易形成此疾病的動物，且要易得。

所以，對于不太熟悉的人來說，要多看文獻(xiàn)，參考別人是如何選擇的。就算是對動物比較了解，系統(tǒng)學(xué)過這方面知識的，動物實(shí)驗(yàn)外包公司怎么找，也要多看文獻(xiàn)，實(shí)驗(yàn)動物外包，綜合權(quán)衡。切忌隨意地憑空想像。

第二，采取什么樣的方法造模？做動物實(shí)驗(yàn)通常是要造模的。選擇什么樣的方式？這要從實(shí)驗(yàn)的目的及條件入手。造，可以用手術(shù)，也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素（STZ）。后者用得較多，且為國際認(rèn)同。

而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》，二是參照文獻(xiàn)。造模方法有時(shí)也決定了你的動物選擇。像做手術(shù)造動脈粥樣硬化，我想用大鼠比小鼠來得方便吧？

第三，經(jīng)費(fèi)承受能力如何？做實(shí)驗(yàn)也要精打細(xì)算。不可能為了所謂的高水平、技術(shù)而不顧實(shí)驗(yàn)室的條件。像做高脂動物模型，假設(shè)經(jīng)費(fèi)只有一萬多元，一定要弄個(gè)敲除APoE基因的小鼠來做，恐怕沒人認(rèn)同。做一個(gè)簡單的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，你非得要用SPF實(shí)驗(yàn)室，這也是不太實(shí)際的，也是沒必要的。

實(shí)驗(yàn)動物各種體液、的采集方法

消化液的采集

(一) 唾液

1. 直接抽取法 在急性實(shí)驗(yàn)中， 可用吸管直接插入動物口腔或唾液腺導(dǎo)管抽吸唾液，此法非常簡單，但從口腔抽吸唾液會有雜質(zhì)混入。

2. 制造腮腺瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集狗的唾液，要用手術(shù)方法將腮腺導(dǎo)管開口移向體外，即以腮腺導(dǎo)管為中心，切成一直徑約2～3cm的圓形粘膜片，將此粘膜片，與周圍組織分開，穿過皮膚切口引到頰外，將帶有導(dǎo)管開口的粘膜片與周圍的皮膚縫合，腮腺分泌的唾液就流出頰外。這種方法可以收集到較純凈的唾液。

(二)胃液

1. 直接收集胃液法 急性實(shí)驗(yàn)時(shí)，先將動物，將插胃管經(jīng)口插入胃內(nèi)，在灌胃管的出口連一，用此可收集到胃液，此法適用于狗等大型動物。如是大鼠，需手術(shù)剖腹，從幽門端向胃內(nèi)插入一塑料管，再由口腔經(jīng)食道將一塑料管插入前胃，用pH7.5、35℃左右的生理鹽水，以12ml/h的流速灌胃，收集流出液，進(jìn)行分析。

2. 制備胃瘺法 在慢性實(shí)驗(yàn)中，收集胃液多用胃瘺法，如全胃瘺法、巴氏小胃瘺法、海氏小胃瘺法等。制備小胃是將動物的胃分離出一小部分，縫合起來形成小胃，主胃與小胃互不相通，主胃進(jìn)行正常消化，從小胃可收集到純凈的胃液。應(yīng)用該法，可以待動物恢復(fù)健康后，在動物清醒狀態(tài)下反復(fù)采集胃液。

(三)胰液和膽汁

在動物實(shí)驗(yàn)中，主要是通過對胰總管和膽總管的插管而獲得胰液或膽汁。狗的胰總管開口于十二指腸降部，在緊靠腸壁處切開胰管，結(jié)扎固定并與導(dǎo)管相連，即可見無色的胰液流入導(dǎo)管。大鼠的胰管與膽管匯集于一個(gè)總管，在其入腸處插管固定，并在近肝門處結(jié)扎和另行插管，可分別收集到胰液和膽汁。

有時(shí)也可通過制備胰瘺和膽囊瘺來獲得胰液和膽汁。