英瀚斯-南京肺動(dòng)脈高壓模型公司

tang尿病模型

tang尿病構(gòu)建

一般tang尿病模型構(gòu)建的方法有：自發(fā)突變，飲食誘導(dǎo)，化學(xué)誘導(dǎo)，手術(shù)誘導(dǎo)，轉(zhuǎn)基因/基因敲除等。此方法為飲食誘導(dǎo)＋化學(xué)試劑誘導(dǎo)，一般是用STZ加高脂高糖的膳食誘導(dǎo)來(lái)構(gòu)建tang尿病模型模型。STZ即鏈脲佐菌素streptozocin簡(jiǎn)稱，是一種小片狀或者棱柱狀結(jié)晶體，能溶于水。因其對(duì)一定種類的動(dòng)物的胰島β細(xì)胞有選擇性破壞作用，能誘發(fā)許多動(dòng)物的tang尿病，所以一般用它來(lái)構(gòu)建糖tang尿病模型。

實(shí)驗(yàn)方法

Step1：用高脂肪高糖的膳食飼喂小鼠，誘導(dǎo)出胰島素，持續(xù)約4-6周；

Step2：注射STZ溶液：術(shù)前禁食12小時(shí)，之后進(jìn)行給藥處理；

Step3：一段時(shí)間以后取血，用血糖yi檢測(cè)小鼠的禁食12h的血糖濃度；

Step4：血糖濃度≥16.7mmol/L時(shí)判斷建模成功，稱量體重。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇

大鼠

大鼠的門齒很長(zhǎng)，在抓取方法不當(dāng)而受到驚嚇或激怒時(shí)易將操作者手指咬傷，所以，不要突然式地去抓它，取用時(shí)應(yīng)輕輕抓住其尾巴后提起，置于實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，用玻璃鐘罩扣住或置于大鼠固定盒內(nèi)，這樣即可進(jìn)行尾靜脈取血或注射。如要作腹腔注射或灌胃等操作時(shí)，實(shí)驗(yàn)者應(yīng)戴上棉紗手套(有經(jīng)驗(yàn)者也可不戴)，右手輕輕抓住大鼠的尾巴向后拉，但要避免抓其，以防尾巴皮膚脫落，左手抓緊鼠兩耳和頭頸部的皮膚，并將大鼠固定在左手中，右手即可進(jìn)行操作。

睡眠剝奪模型

實(shí)驗(yàn)用金屬箱直徑35 cm， 每箱裝1只大鼠。REMSD 各組分別置于直徑為6.5 cm的小站臺(tái)上，對(duì)照組大鼠置于直徑15 cm的大站臺(tái)上，周圍是水環(huán)境，水深3 cm，平臺(tái)在水面以上1 cm，于平臺(tái)以上14 cm 處放籠罩，上面放水和食物。水溫和室溫保持在25 C，每日換水并打掃實(shí)驗(yàn)箱。REMSD 組大鼠在小臺(tái)上屈曲而立，在快動(dòng)眼睡眠(rapid eye movement sleep，肺動(dòng)脈高壓模型制作， REMS) 時(shí)，由于伴隨全身肌肉松弛和節(jié)律性垂頭，大鼠落入水中而驚醒，再爬上站臺(tái)。用此方法自18:00開(kāi)始連續(xù)剝奪大鼠的REMS至相應(yīng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)。

?曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)( open field test， OFT )

實(shí)驗(yàn)裝置為高60 cm、 底面邊長(zhǎng)100 cm、內(nèi)壁涂黑的無(wú)蓋方箱，底面平均分為25個(gè)小方格，正上方2 m處架一攝像機(jī)，鏡頭對(duì)準(zhǔn)箱底，實(shí)驗(yàn)在安靜環(huán)境下進(jìn)行，大鼠置于方箱底面中心，同時(shí)進(jìn)行攝像和計(jì)時(shí)，3 min 后停止攝像，更換動(dòng)物后，繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2次實(shí)驗(yàn)之間清洗箱壁及底面，以免上次動(dòng)物余留的信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。計(jì)分方法:通過(guò)放像設(shè)備，觀察大鼠3 min內(nèi)越過(guò)的格子數(shù)為水平得分，后肢站立次數(shù)為垂直得分，兩者之和為OFT總得分。REMSD實(shí)驗(yàn)前后均進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。