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miRNA測序
microRNA(miRNA)是一種大小約21—23個堿基的單鏈小分子RNA,是由具有發(fā)夾結(jié)構(gòu)的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經(jīng)過Dicer酶加工后生成,不同于siRNA(雙鏈)但是和siRNA密切相關(guān)。microRNA通過和靶基因mRNA堿基配對引導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)降解mRNA或抑制mRNA的翻譯,從而在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控蛋白表達(dá)(新發(fā)現(xiàn)miRNA也能在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控基因表達(dá))。miRNA在物種進(jìn)化中相當(dāng)保守,在動物、植物和等中發(fā)現(xiàn)的miRNA表達(dá)均有嚴(yán)格的組織特異性和時序性。miRNA在細(xì)胞生長和發(fā)育過程中起多種作用,單核苷酸多態(tài)性(SNP)檢測試驗,包括調(diào)控發(fā)育、分化、凋亡和增殖等。
目前研究miRNA的方法主要是realtime-PCR、生物芯片技術(shù)以及第二代測序技術(shù)。基于第二代測序技術(shù)的miRNA測序,可以一次獲得數(shù)百萬條miRNA序列,能夠快速鑒定出不同組織、不同發(fā)育階段、不同疾病狀態(tài)下已知和未知的miRNA及其表達(dá)差異,為研究miRNA對細(xì)胞進(jìn)程的作用及其生物學(xué)影響提供了有力工具。





蛋白質(zhì)互作驗證服務(wù)
在后基因組時代,基因的表達(dá)產(chǎn)物蛋白質(zhì)作為生物功能直接的執(zhí)行者和體現(xiàn)者,在生物集體的生理及病理中扮演著重要的角色。高通量的蛋白質(zhì)組學(xué)研究技術(shù)可以在上述過程中篩選出具有潛在價值的生物標(biāo)記和靶點。但是長期以來,大規(guī)模的蛋白質(zhì)表達(dá)分析譜并沒有提升我們對生物標(biāo)志物的認(rèn)識,其主要原因是差異蛋白的分析結(jié)果缺乏規(guī)?;尿炞C。

Southern雜交
實驗原理
? ? ? Southern印跡雜交(Southern blot)是1975年由英國人southern創(chuàng)建,是研究DNA圖譜的基本技術(shù)。Southern印跡雜交是進(jìn)行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化的DNAl片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNAl片段轉(zhuǎn)移至尼龍膜或其他固相支持物上,經(jīng)干烤或者紫外線照射固定,再與相對應(yīng)結(jié)構(gòu)的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交,用放l射自顯影或酶反應(yīng)顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。
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