英瀚斯-南京肺動(dòng)脈高壓模型搭建

睡眠剝奪模型

實(shí)驗(yàn)用金屬箱直徑35 cm， 每箱裝1只大鼠。REMSD 各組分別置于直徑為6.5 cm的小站臺(tái)上，對(duì)照組大鼠置于直徑15 cm的大站臺(tái)上，周?chē)撬h(huán)境，水深3 cm，平臺(tái)在水面以上1 cm，于平臺(tái)以上14 cm 處放籠罩，上面放水和食物。水溫和室溫保持在25 C，每日換水并打掃實(shí)驗(yàn)箱。REMSD 組大鼠在小臺(tái)上屈曲而立，在快動(dòng)眼睡眠(rapid eye movement sleep， REMS) 時(shí)，由于伴隨全身肌肉松弛和節(jié)律性垂頭，大鼠落入水中而驚醒，再爬上站臺(tái)。用此方法自18:00開(kāi)始連續(xù)剝奪大鼠的REMS至相應(yīng)實(shí)驗(yàn)時(shí)間點(diǎn)。

?曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)( open field test， OFT )

實(shí)驗(yàn)裝置為高60 cm、 底面邊長(zhǎng)100 cm、內(nèi)壁涂黑的無(wú)蓋方箱，底面平均分為25個(gè)小方格，正上方2 m處架一攝像機(jī)，鏡頭對(duì)準(zhǔn)箱底，實(shí)驗(yàn)在安靜環(huán)境下進(jìn)行，大鼠置于方箱底面中心，同時(shí)進(jìn)行攝像和計(jì)時(shí)，3 min 后停止攝像，更換動(dòng)物后，繼續(xù)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。2次實(shí)驗(yàn)之間清洗箱壁及底面，以免上次動(dòng)物余留的信息影響下次實(shí)驗(yàn)結(jié)果。計(jì)分方法:通過(guò)放像設(shè)備，觀察大鼠3 min內(nèi)越過(guò)的格子數(shù)為水平得分，心肌缺血模型建立，后肢站立次數(shù)為垂直得分，兩者之和為OFT總得分。REMSD實(shí)驗(yàn)前后均進(jìn)行曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)。

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇在此，提幾點(diǎn)原則和方法。

第①，做什么樣的實(shí)驗(yàn)？什么動(dòng)物適合本實(shí)驗(yàn)？做什么實(shí)驗(yàn)，這是選題時(shí)就確定好了的。肯定是經(jīng)過(guò)論證的。無(wú)需多講。用什么樣的動(dòng)物呢？我想，大多是參照文獻(xiàn)，再結(jié)合自己對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的了解。選題之時(shí)就肯定閱讀過(guò)很多文獻(xiàn)了，因此不會(huì)陌生。

如：做高、動(dòng)脈粥樣硬化，我想大多數(shù)人會(huì)選擇大鼠、兔子，也可以選金黃地鼠、，少數(shù)人會(huì)選小鼠，但我想用狗和猴的基本上不會(huì)有吧。因?yàn)橐x擇比較容易形成此疾病的動(dòng)物，且要易得。

所以，對(duì)于不太熟悉的人來(lái)說(shuō)，要多看文獻(xiàn)，參考別人是如何選擇的。就算是對(duì)動(dòng)物比較了解，系統(tǒng)學(xué)過(guò)這方面知識(shí)的，也要多看文獻(xiàn)，綜合權(quán)衡。切忌隨意地憑空想像。

第二，采取什么樣的方法造模？做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)通常是要造模的。選擇什么樣的方式？這要從實(shí)驗(yàn)的目的及條件入手。造，可以用手術(shù)，也可以用。其中有四氧及鏈脲佐菌素（STZ）。后者用得較多，且為國(guó)際認(rèn)同。

而四氧目前用得較少了。造模方法一是參照《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》，二是參照文獻(xiàn)。造模方法有時(shí)也決定了你的動(dòng)物選擇。像做手術(shù)造動(dòng)脈粥樣硬化，我想用大鼠比小鼠來(lái)得方便吧？

第三，經(jīng)費(fèi)承受能力如何？做實(shí)驗(yàn)也要精打細(xì)算。不可能為了所謂的高水平、技術(shù)而不顧實(shí)驗(yàn)室的條件。像做高脂動(dòng)物模型，假設(shè)經(jīng)費(fèi)只有一萬(wàn)多元，一定要弄個(gè)敲除APoE基因的小鼠來(lái)做，恐怕沒(méi)人認(rèn)同。做一個(gè)簡(jiǎn)單的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)，你非得要用SPF實(shí)驗(yàn)室，這也是不太實(shí)際的，也是沒(méi)必要的。

動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則

可靠性

的動(dòng)物模型來(lái)應(yīng)該力求可靠地反映人類疾病，即可特異地、可靠地反映某種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化，應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，經(jīng)化驗(yàn)或 X?照片、心電圖、病理切片等證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動(dòng)物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與疾病相混淆的疾病者也不宜選用。例如鉛可用大白鼠做模型，但有缺點(diǎn)，因?yàn)樗旧砣菀谆紕?dòng)物地方性及進(jìn)行性，后者容易鉛所致的相混淆，不易確定該是鉛所致還是它本身的疾病所致。用蒙古沙土鼠就比較容易確定，因?yàn)橐话阒挥秀U才會(huì)使它出現(xiàn)相應(yīng)的變。