南京英瀚斯生物科技(圖)-流式細(xì)胞技術(shù)-內(nèi)蒙古細(xì)胞

MTT檢測

MTT 是一種檢測細(xì)胞存活和生長的方法。其檢測原理為活xi胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性 MTT 還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二jia基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免yi檢測儀在 570nm 波長處測定其光吸收值，細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，可間接反映活xi胞數(shù)量。

磁性細(xì)胞標(biāo)記方式

應(yīng)用MACS技術(shù)進(jìn)行磁性細(xì)胞分選重要的一點(diǎn)是高質(zhì)量的標(biāo)記。要盡可能地增強(qiáng)陽性細(xì)胞的標(biāo)記，并減弱背景染色。有兩種基本的磁性標(biāo)記方式:直接標(biāo)記和間接標(biāo)記。

1、直接磁性細(xì)胞標(biāo)記(Direct magnetic cell labeling)

(磁珠結(jié)合的細(xì)胞就是所要分離獲得的細(xì)胞)直接標(biāo)記是快速、特異的磁性標(biāo)記方法。目前有多種分選人、小鼠、大鼠以及非人類靈長類細(xì)胞的MACS直標(biāo)微珠可供選用。

2、間接磁性細(xì)胞標(biāo)記(Indirect magnetic cell labeling )

(磁珠結(jié)合不需要的細(xì)胞，游離于磁場的細(xì)胞為所需細(xì)胞)間接磁性細(xì)胞標(biāo)記需要聯(lián)合使用單ke隆或者多ke隆抗ti和MACS間標(biāo)微珠。未結(jié)合抗ti、生物素化抗ti或者熒光素標(biāo)記抗ti均可作為一抗標(biāo)記細(xì)胞，再使用抗免yi球蛋白微珠、抗生物素或鏈霉親和素微珠、抗熒光素微珠作為二抗磁性標(biāo)記細(xì)胞。幾乎針對(duì)任何種系任何細(xì)胞的任何一種單抗或多抗，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室，均可用于間接標(biāo)記。間接標(biāo)記主要在如下情況時(shí)選用:當(dāng)沒有直標(biāo)磁珠時(shí);需要用幾種抗ti的混合物同時(shí)分選或去除多種類型的細(xì)胞;間接標(biāo)記有放大作用，內(nèi)蒙古細(xì)胞，因此可在磁性分選抗原表達(dá)弱的目的細(xì)胞時(shí)使用;使用自備或者配體的磁珠分選中。( -般而言，陰性分離法的磁珠用量比陽性分離法的大，流式細(xì)胞技術(shù)，陽性分離法用行更多。)

yao物對(duì)細(xì)胞的IC50檢測 ?

? ? ?IC50 (half maximal inhibitory conceation)是指被測量的拮抗劑的半抑制濃度。它能指示某一yao物或者物質(zhì)(yi制劑)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物質(zhì)，比如酶，細(xì)胞受體或是微生物)的半量。在凋亡方面，可以理解為一定濃度的某種藥wu誘導(dǎo)腫liu細(xì)胞凋亡50%，該濃度稱為50%抑制濃度，即凋亡細(xì)胞與全部細(xì)胞數(shù)之比等于50%時(shí)所對(duì)應(yīng)的濃度，IC50值可以用來衡量yao物誘導(dǎo)凋亡的能力，即誘導(dǎo)能力越強(qiáng)，該數(shù)值越低，當(dāng)然也可以反向說明某種細(xì)胞對(duì)yao物的耐受程度。