動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)外包-動(dòng)物模型-英瀚斯生物科技

3輕柔刺激法

此方法在短期的睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)中應(yīng)用較多，當(dāng)實(shí)驗(yàn)人員通過觀察大鼠行為或通過腦電波監(jiān)護(hù)觀察到大鼠進(jìn)入睡眠時(shí)，通過輕輕拍打大鼠籠子或應(yīng)用聲音、光線的刺激促使大鼠保持清醒，必要時(shí)還可用紙卷、鉛筆或用手直接觸摸大鼠使大鼠無法進(jìn)入睡眠。注意不能將大鼠移出籠外!此方法簡(jiǎn)單易行，在腦電監(jiān)護(hù)情況下可進(jìn)行 TSD 或 SSD 實(shí)驗(yàn)，在無腦電監(jiān)護(hù)時(shí)需要實(shí)驗(yàn)人員在旁不間斷觀察大鼠行為，故較適合行短時(shí)間的睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)。

4睡眠剝奪法

定時(shí)給大鼠注射， 此類方法簡(jiǎn)單易行，操作方便，不需要特殊儀器。缺點(diǎn)是大鼠存在個(gè)體差異， 睡眠剝奪的效果及程度及不易掌握。多用在研究某些特殊藥理作用的實(shí)驗(yàn)中。

難點(diǎn)與關(guān)鍵點(diǎn)

將灌注針插入主動(dòng)脈內(nèi)是灌注固定的關(guān)鍵，也是難點(diǎn)。首先準(zhǔn)確找到主動(dòng)脈，這是此步驟的要點(diǎn)?？捎脺厣睇}水將胸腔內(nèi)的血液沖洗干凈，用鑷子輕輕夾住心 外膜（夾的越少越好，以免影響取材）將心臟向左上方提起，即可看清主動(dòng)脈，又可使灌注針很容易地插入主動(dòng)脈內(nèi)。插入時(shí)動(dòng)作要慢，針尖方向不要偏向右側(cè)，以 免刺入右心房，如果感到有阻力，則將針退后、調(diào)整方向重新進(jìn)針，直到進(jìn)入主動(dòng)脈，灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈后可在心臟的上方看到其位置，灌注針進(jìn)入主動(dòng)脈的長(zhǎng)度 好為 3~5 毫米，然后用絲線扎緊。切勿將灌注針放在左心室內(nèi)，這樣由于主動(dòng)脈瓣的關(guān)閉，灌注液很難進(jìn)入主動(dòng)脈，而是沿著心室的切口流出，致使灌注失敗。另 外，灌注針插入成功后，一定要用剪開右心耳而不是右心室，這是灌流液的出口。剪開心尖的位置一定要掌握好，不能偏右使灌注針插入右心室。

1.3改良多平臺(tái)睡眠剝奪法

在MMPM 中將 10 只大鼠(具體數(shù)目可根據(jù)實(shí)際需要確定)同時(shí)放在裝有 14 或 15 個(gè)臺(tái)的水槽中(長(zhǎng) 127 cm ，寬 44 cm ，高 45 cm )進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，這樣既避免了 SP及M P中單只大鼠與群體隔離的缺點(diǎn)，動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)外包，又保留了 M P 中活動(dòng)范圍增大的特點(diǎn)，因在實(shí)驗(yàn)時(shí)大鼠多是 3 只或 4 只一籠進(jìn)行飼養(yǎng)，如 1 組實(shí)驗(yàn)需 10 只大鼠，則需要3籠或 4籠大鼠，考慮到來自不同籠的大鼠放在一起實(shí)驗(yàn)也可能造成群體的不穩(wěn)定，有學(xué)者將實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)一步改良，動(dòng)物模型，將實(shí)驗(yàn)所需的 10 只大鼠放在同一只籠中飼養(yǎng) 2 周，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)課題外包，實(shí)驗(yàn)時(shí)再將這些大鼠放在一起同時(shí)進(jìn)行睡眠剝奪實(shí)驗(yàn)，這樣以克服實(shí)驗(yàn)時(shí)大鼠群體不穩(wěn)定的缺點(diǎn)，從而將實(shí)驗(yàn)時(shí)的不確定因素減至低! 實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)在MMPM中'經(jīng)采取措施保持大鼠群體穩(wěn)定性及避免大鼠與群體分離后' 大鼠上腺重量%體重減輕量%中促上腺皮質(zhì)(A CTH )和上腺皮質(zhì)酮 (CO RT) 的含量均較M P中為低，提示M M PM 較 M P 具有更低的應(yīng)激性，是較為理想的REM 剝奪方法。