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關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題:
Q: 細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中出現(xiàn)碎片如何處理?
A: 貼壁細(xì)胞在移除原培養(yǎng)液后,用 PBS 沖洗 2-3 遍;懸浮細(xì)胞離心移除原培養(yǎng)液后,加入 PBS 重懸,離心移除 PBS; 一般建議重復(fù)上述步驟 2-3 遍,用 800-1000rpm 離心 3-5 分鐘。
Q:細(xì)胞凍存能放在 -80℃ 保存嗎?
A:長(zhǎng)期保存的細(xì)胞應(yīng)當(dāng)放在液氮(-196℃)中保存,短時(shí)間(一般 1 周-2 周)可以存放在 -80℃。
Q:培養(yǎng)瓶是用密封蓋好,還是用透氣蓋好?
A:都可以。只是在使用密封蓋培養(yǎng)瓶時(shí),瓶蓋旋至約 2/3,不要完全擰緊,預(yù)留約 1/3 以便細(xì)胞可以透氣;有些品牌的密封蓋培養(yǎng)瓶的瓶蓋上有適合位置指示標(biāo)志。
Q:何謂 FBS,F(xiàn)CS,CS,HS?
A: Fetal bovine serum(FBS)和 Fetal Calf Serum(FCS)之間沒(méi)有區(qū)別,流式細(xì)胞技術(shù),都是指胎牛;FCS 不是正規(guī)命名,細(xì)胞周期,盡量不使用。Calf Serum(CS)則是指小牛。Horse Serum(HS)則是指馬。
關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)問(wèn)題
Q:培養(yǎng)液到底要不要加雙抗(青&鏈)?
A:雙抗不是細(xì)胞生長(zhǎng)必需的。我們培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)不常規(guī)使用,因?yàn)檫B續(xù)使用會(huì)促進(jìn)耐藥性細(xì)胞株的產(chǎn)生,導(dǎo)致輕度污染持續(xù)存在。一旦將從培養(yǎng)液中去除,這種輕度污染終將發(fā)展成為大規(guī)模污染。具體情況,可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境,自行決定是否使用雙抗。
Q:細(xì)胞培養(yǎng),能更換成其它種類(lèi)的培養(yǎng)基嗎?
A:我們強(qiáng)烈建議好使用細(xì)胞提供機(jī)構(gòu)或細(xì)胞庫(kù)推薦的生長(zhǎng)培養(yǎng)液。有些細(xì)胞可能會(huì)適應(yīng)在不同培養(yǎng)基中生長(zhǎng),在做好保種的條件下,達(dá)州細(xì)胞,可以分出部分細(xì)胞做測(cè)試。
細(xì)胞分化
細(xì)胞分化是指同一來(lái)源的細(xì)胞逐漸產(chǎn)生出形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征各不相同的細(xì)胞類(lèi)群的過(guò)程,293t細(xì)胞,其結(jié)果是在空間上細(xì)胞產(chǎn)生差異,在時(shí)間上同一細(xì)胞與其從前的狀態(tài)有所不同。細(xì)胞分化的本質(zhì)是基因組在時(shí)間和空間上的選擇性表達(dá),通過(guò)不同基因表達(dá)的開(kāi)啟或關(guān)閉,終產(chǎn)生標(biāo)志性蛋白質(zhì)。細(xì)胞誘導(dǎo)是指將一群不同類(lèi)型或者形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征存在差異的細(xì)胞通過(guò)生物學(xué)、物理學(xué)等手段,將之轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂邢嗨?相同形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能特征的細(xì)胞群體的過(guò)程。

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