內(nèi)江細(xì)胞-流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果分析-英瀚斯(推薦商家)

公司目前擁有多項(xiàng)產(chǎn)品及技術(shù)，其中發(fā)明兩項(xiàng)，軟件著作權(quán)八項(xiàng)，實(shí)用新型三項(xiàng)，商標(biāo)兩件。公司先后獲得“江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)”、“江蘇省科技型中小企業(yè)”、“江蘇省專精特新中小企業(yè)”等榮譽(yù)資質(zhì)，連續(xù)多年被評(píng)為“東南大學(xué)大學(xué)科技園企業(yè)”。2019年公司成為江蘇省生物技術(shù)協(xié)會(huì)第七屆理事會(huì)的特邀理事，成立了“李冬冬工作室”，并獲得了南京市“工人先鋒號(hào)”的榮譽(yù)稱號(hào)。

關(guān)于細(xì)胞培養(yǎng)的常見問(wèn)題

Q：培養(yǎng)液到底要不要加雙抗（青&鏈）？

A：雙抗不是細(xì)胞生長(zhǎng)必需的。我們培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)不常規(guī)使用，內(nèi)江細(xì)胞，因?yàn)檫B續(xù)使用會(huì)促進(jìn)耐藥性細(xì)胞株的產(chǎn)生，導(dǎo)致輕度污染持續(xù)存在。一旦將從培養(yǎng)液中去除，這種輕度污染終將發(fā)展成為大規(guī)模污染。具體情況，可根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境，自行決定是否使用雙抗。

Q：細(xì)胞培養(yǎng)，能更換成其它種類的培養(yǎng)基嗎？

A：我們強(qiáng)烈建議好使用細(xì)胞提供機(jī)構(gòu)或細(xì)胞庫(kù)推薦的生長(zhǎng)培養(yǎng)液。有些細(xì)胞可能會(huì)適應(yīng)在不同培養(yǎng)基中生長(zhǎng)，在做好保種的條件下，可以分出部分細(xì)胞做測(cè)試。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)

操作步驟

1.將長(zhǎng)滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶中原來(lái)的培養(yǎng)液棄去。

2、加入0.5- -1ml 0.25%胰酶溶液，使瓶底細(xì)胞都浸入溶液中。

3、瓶口塞好橡皮塞，放在倒置鏡下觀察細(xì)胞。隨著時(shí)間的推移，原貼壁的細(xì)胞逐漸趨于圓形，流式細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果分析，在還未漂起時(shí)將胰酶棄去，加入10m培養(yǎng)液終止消化。觀察消化也可以用肉眼，細(xì)胞周期，當(dāng)見到瓶底發(fā)白并出現(xiàn)細(xì)zhen孔空隙時(shí)終止消化。一般室溫消化時(shí)間約為1- -3分鐘。

4、用吸管將貼壁的細(xì)胞吹打成懸液，分到另外兩到三瓶中，實(shí)踐培養(yǎng)液塞好橡皮塞，置37°C下繼續(xù)培養(yǎng)。第二天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。

附:消化液配制方法:

稱取0.25克胰酶蛋白酶(活力為1 : 250)， 加入100ml無(wú)Ca2+、Mg2+的Hank's液溶解，293t細(xì)胞，濾器過(guò)濾chu菌，4°C保存，用前可在379C下回溫。胰酶溶液中也可加入EDTA，使終濃度達(dá)0.02%。