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實(shí)驗(yàn)動(dòng)物大、小鼠的采血方法
1、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中剪尾采血:需血量少時(shí)可用此方法。將動(dòng)物固定,顯露尾部,將尾塵剪去約5mm,從尾根部向尾端部,血即從斷端流出。若用二棉球涂擦尾部或事先將鼠尾浸在45℃水中數(shù)分鐘,使尾部血管充盈,可采到較多的血,但注意二可致溶血。也可用鋒利割破尾動(dòng)脈或尾靜脈,讓血液自行流出,采血后,消毒,止血。如將動(dòng)物取血量可更多些。小鼠每次采血約0.1ml,可以做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的公司,大鼠約0.4 ml。為了多次反復(fù)取血應(yīng)盡量從鼠尾末端開(kāi)始。
2、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中摘眼球采血:此法常用于鼠類(lèi)大量采血。用左手固定動(dòng)物,壓迫眼球,盡量使眼球突出,右手用無(wú)鉤彎鑷子或彎止血鉗迅速摘除眼球,立即將鼠倒置,頭朝下,眼眶內(nèi)很快流出血液。一般只適用于一次采血。大部動(dòng)物采血后可以存活,可采另一側(cè)眼球取血。
大鼠后眼框靜脈叢取血方法
4、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中頸靜脈或頸動(dòng)脈采血:將鼠,剪去一側(cè)頸部外側(cè)被毛,作頸靜脈或頸動(dòng)脈分離手術(shù),用即可抽出所需血量。也可插入導(dǎo)管,反復(fù)采血。
5、斷頭采血:操作者左手拇指和食指握住鼠頸部,頭朝下,用利剪在頭頸間1/2處迅速剪動(dòng)物頭部,提起動(dòng)物,血液即可流入準(zhǔn)備好的容器中。
6、心臟采血:將動(dòng)物,使其仰位固定,剪去胸前區(qū)毛,消毒皮膚,在左側(cè)第3—4肋間選擇心博強(qiáng)處穿刺,血液借心臟跳動(dòng)的力量進(jìn)入。亦可在動(dòng)物后,切開(kāi)動(dòng)物胸腔,直視心臟內(nèi)抽血或剪破心臟,直接用、吸管等吸血。
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇
小鼠
小鼠性情較溫順,一般不會(huì)咬人,比較容易抓取固定。通常用右手提起小鼠尾巴將其放在鼠籠蓋或其它粗糙表面上,在小鼠向前掙扎爬行時(shí),用左手拇指和食指捏住其雙耳及頸部皮膚,將小鼠置于左手掌心、無(wú)名指和小指夾其背部皮膚和尾部,即可將小鼠固定。在一些特殊的實(shí)驗(yàn)中,如進(jìn)行尾靜脈注射時(shí),可使用特殊的固定裝置進(jìn)行固定,如尾靜脈注射架或粗的玻璃試管。如要進(jìn)行手術(shù)或心臟采血應(yīng)先ma醉再操作,如進(jìn)行解剖實(shí)驗(yàn)則必須先無(wú)痛處死后再進(jìn)行。
HBV模型的建立方法
(1)方法:主要使用各種技術(shù)來(lái)創(chuàng)建HBV病毒小鼠模型。小鼠模型可分為HBV部分片段和HBV全長(zhǎng)或超長(zhǎng)序列模型。
(2)模型特征HBV小鼠不受HBV的影響,不會(huì)引起免yi。該模型可用于觀察HBV對(duì)肝細(xì)胞的直接破壞作用。含有外源啟動(dòng)子的HBsAg小鼠(50-4)產(chǎn)生大量HBsAg大包膜蛋白。這會(huì)導(dǎo)致很長(zhǎng)的,有時(shí)是分支的桿狀HBsAg積聚在肝細(xì)胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中,并且無(wú)法有效分泌。肝細(xì)胞顯示出毛玻璃變色并損害肝細(xì)胞。小鼠中的HBV標(biāo)記主要在gan臟中表達(dá),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,也可以在shen臟,yi腺和外周血等qi官中表達(dá),動(dòng)物實(shí)驗(yàn),尤其是在1,096 bp 1.3拷貝的HBV小鼠中。xue清HBV DNA的水平相當(dāng)于3x10000000至9x10000000基因組當(dāng)量/毫升,相當(dāng)于慢性HBVgan染者的水平。它可以檢測(cè)血液中的HBsAg,動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn),S1前和HBeAg,是用于yao物篩選的you秀模型。
(3)建立比較yao物HBV小鼠模型在HBV分子生物學(xué)和免yi學(xué)研究中,特別是在加強(qiáng)肝細(xì)胞HBV感ran的分子機(jī)制方面,具有重要意義。

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